TPS法提取植物DNA.docx

TPS法提取植物DNA取少量叶片置2ml管子中，加入钢珠；粉碎机粉碎加入400-500ulTPS，75℃水浴30mins；；12000rpm离心10mins；取上清加等体积异丙醇，放置-20℃5h以上；12000rpm离心5mins，去上清；加入200ul75%酒精，静置10mins，离心2mins，去酒精，干燥；加50ulddH2O，混合均匀，离心。TPS配方100ml1M(PH8.0)Tris-HCl10ml0.5MEDTA(PH8.0)2mlKCl7.45gddH2O至100ml优点：该方法适合大量粗提取DNA，如果现提现用可以直接吸取上清液并稀释5或10倍直接使用（适用于PCR鉴定转基因以及大群体图位克隆）。经过异丙醇沉淀之后DNA有较好的质量，4℃能够储存超过一星期，该方法相对正常的SDS或是CTAB法能够省去24:1的毒害而且经过测试实际效果不输CTAB法。如果足够懒惰还可以一小片叶片放96孔板直接加TPS放PCR仪95℃30min，然后稀释使用。缺点：DNA质量低，不宜扩增长片段；DNA不能长时间储存；由于DNA杂质多，引物要求高，部分引物会扩增出杂带。