植物叶片中DNA的提取.ppt

植物叶片DNA的提取DNAextraction实验原理实验材料和试剂实验仪器离心机各种型号的微量移液枪研钵实验步骤：

水稻幼苗或叶片0.1-0.2g,剪碎,置研钵中，加入1mL提取缓冲液，
研磨成浆；
2.吸入1.5mLEP管中，剧烈摇动混匀；
3.60℃水浴保温30-60min，不时颠倒混匀；
4.室温下10000rpm离心5min；
5.小心吸上清于新的离心管中，加入等体积氯仿，剧烈震动；
6.室温下10000rpm离心5min；
7.小心将上清吸入新的离心管中；
8.加入1倍体积异丙醇，室温下放置片刻即出现絮状DNA沉淀。
8000rpm离心5min，弃掉上清；
75％酒精洗一次，晾干沉淀；
10.加入5μLRNaseA（10μg/μL）,37℃10min,除去RNA。
11.加50-100μl水融解，-20贮存。1.植物叶子0.1-0.2g,剪碎置预冷研钵中2.吸入1.5mLeppendorf管中，摇动混匀3.60℃水浴保温30-60min4.10000rpm离心5min5.吸上清于新的离心管中，加入等体积氯仿，颠倒混匀6.再次10000rpm离心5min；将上清小心吸入新的离心管中；7.加入1倍体积异丙醇，-20℃放置10min，出现絮状DNA沉淀；

随后8000rpm离心5min，弃掉上清；75％酒精洗沉淀一次晾干沉淀；加5μLRNaseA(10μg/μL),37℃10min,除去RNA；

加50-100μL的TEBuffer，取1-5μL电泳检测；其余-20℃贮存备用。DNA样品在0.7%Agarose胶上电泳（例图）实验注意事项思考题:

为什么构建DNA文库时,一定要用大分子DNA？
2.如何检测和保证DNA的质量？