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本发明涉及病毒检测技术领域,具体公开一种快速检测猪轮状病毒的引物和探针、试剂盒及其使用方法。引物和探针的序列为:上游引物为SEQIDNO:1;下游引物为SEQIDNO:2;探针的序列为SEQIDNO:3。本发明引物和探针的灵敏度高,最低检测限能达到13拷贝/μL,用于RT?RPA检测方法中,恒温条件下仅需要20min即可完成反应,且结合测流层析试纸条可实现肉眼可视化RPA检测猪轮状病毒,有利于对猪轮状病毒的早期快速诊断,同时,对仪器设备的要求低,实现了在非实验室条件下快速直观检测猪轮状病毒的目的,适用于野外现场检测,对猪场一线PoRV的快速诊断和防控具有十分重要的意义。