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本公开提供了一种高体鰤精子稀释液及其制备方法与应用,高体鰤精子稀释液包括基础稀释液和胎牛血清,所述基础稀释液与所述胎牛血清的体积比为8?10:1;其中,所述基础稀释液包括:钠盐3.5?4.5g/L;渗透压调节剂0.1?1.8g/L;用于抑制精子激活的抑制剂0.1?0.9g/L;用于调节精子活动力的调节剂0.1?0.5g/L;糖源1.5?3.5g/L及超纯水。精子稀释液能够延长高体鰤精子的保存时间,能够显著提高高体鰤雄鱼精子的运动持续时长,延长精子在海水中的激活能力,从而更加保障卵子的受精率和人工繁殖的成功率,另外精子稀释液对高体鰤精子无损害,也不会激活高体鰤精子。