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本发明提供了一种金纳米团簇?多肽传感器及其制备方法和应用,属于生物化学、环境检测和食品安全技术领域;本发明中,在GO表面修饰巯基得到具有配合基团的多孔材料GO?SH,然后将GO?SH与金纳米粒子结合,得到具有Au?S键的GO与金纳米粒子的混合物1,接着将混合物1与能够凝乳蛋白酶特异性切割的多肽序列结合,得到金纳米团簇?多肽传感器;所述金纳米团簇?多肽传感器能够用于胰凝乳蛋白酶的检测。