维生素C片的含量测定方案.pdf

维生素C片的含量测定方案一、设计背景维生素C片为维生素类非处方药品，由维生素C、淀粉、糊精、羟丙纤维素、亚硫酸氢钠、柠檬酸、硬脂酸镁等组成，本品为白色至淡黄色片。其来源广泛且价格低廉，如常见的蔬菜水果中就含有大量的维生素C。维生素C（化学结构式见图1）最常见剂型有维生素C片、维生素C泡腾片、维生素C泡腾颗粒、维生素C注射液、维生素C颗粒，维生素C片有25mg/片、50mg/片、100mg/片、250mg/片等不同规格。其生活中常使用的维生素C片有汤臣倍健维生素C咀嚼片、安利纽崔莱维生素C咀嚼片等。维生素C又名L-抗坏血酸，是人体内重要的微量元素，参与人体内多种重要生物化学反应，能够保持人体细胞及血管基质的完整性，最早用于坏血病及牙龈出血等病，现已广泛应用于抗病毒、贫血、过敏性反应、心血管系统、癌症、糖尿病等临床辅助治疗。由于维生素C片在临床上的应该越来越广泛，设计一种测定维生素C片含量的方案显得很有必要。本文旨在设计维生素C片的含量测定方案，为维生素C片的质量标准提高提供一定的参考，为其临床合理用药提供相应的参考依据。图1维生素C二、设计依据通过查阅中国知网有关维生素C片及维生素C含量测定的期刊文献和查阅《中国药典》（2020年版）可知，维生素C片含量测定法有碘滴定法、紫外-可见分光光度法、荧光光度分析法和高效液相色谱法等。其中碘量法虽成本较为低廉，操作简单，但是灵敏度受人为因素影响较大，且碘标准溶液不宜长期存放，长时间放置后，可能会有沉淀，淀粉指示剂也需要现配现用，结果的准确性难以保证。紫外-可见分光光度计法测定虽简单、快速、准确，但其专属性不强。荧光光度分析法测定操作简单，快速较为准确，但容易受其他物质的干扰（色素类物质）。高相液相色谱法则具有操作简便、分析速度快、测定结果准确度高、灵敏度高、适应性好、重复性好等优点。考虑到维生素C片中维生素C具有烯二醇结构，活泼性较好，容易被氧化，对仪器设备要求较高，因此本方案选择采用高效液相色谱法测定其含量。三、设计方案1.仪器与试剂（1）仪器十万分之一电子天平（BT125D，天平赛多利斯科学仪器（北京）有限公司）、高效液相色谱仪（Agilent1260，安捷伦科技有限公司）、色谱柱phenomenex-C18（4.6mm×250mm、0.5μm）、精密酸度计（上海精科科学仪器有限公司）、超声波清洗器（HDL龙门，张家港神超声电子有限公司）烧杯、棕色容量瓶等。（2）试剂维生素C对照品（中国食品药品检定研究院，纯度：110.0%）、维生素C片（华中药业股份有限公司，规格：0.1克×100片）、乙腈(霍韦尔贸易（上海）有限公司，色谱纯)、甲醇（霍韦尔贸易（上海）有限公司，色谱纯)、十六烷基三甲基溴化铵（湖南尔康制药股份有限公司，分析纯）、优级磷酸二氢钾（湖南尔康制药股份有限公司，分析纯）、水为纯化水。2.溶液的制备（1）供试品溶液的制备取维生素C片10片，精密称定，记录其平均片重，研细，取粉末适量（约相当于维生素C100mg），精密称定，置于50ml棕色容量瓶中，加入适量流动相25ml，超声波5分钟后，放冷，继续加流动相至刻度线，摇匀，经滤纸过滤，取续滤液。精密量取续滤液1ml于25ml棕色量瓶中，加流动相至刻度线，摇匀，用0.45μm滤膜过滤，取其续滤液，待用。（2）对照品溶液的制备取维生素C对照品约4mg，精密称定，置于50ml棕色容量瓶中，加流动相稀释至刻度线，摇匀，得到维生素C对照品溶液（每1ml溶液中含维生素C约80μg），备用。（3）阴性样品溶液的制备除不加维生素C外，按照处方辅料的比例取淀粉、糊精、羟丙纤维素、亚硫酸氢钠、柠檬酸、硬脂酸镁等适量，研细，取其粉末适量（约相当于维生素C的平均片重），精密称定，置于50ml棕色容量瓶中，加入适量流动相25ml,超声波5分钟后，放冷，继续加流动相至刻度线，摇匀，经滤纸过滤，取续滤液。精密量取续滤液1ml于25ml棕色量瓶中，加流动相至刻度线，摇匀，用0.45μm滤膜过滤，取其续滤液，即得不含维生素C的阴性样品溶液。3.色谱条件色谱柱：色谱柱phenomenex-C18，柱长250mm，内径4.6mm，粒径0.5μm，或同等性能的色谱柱。检测器：紫外检测器。检测波长：245nm。流动相A:6.8g磷酸二氢钾和0.91g十六烷基三甲基溴化铵，用水溶解并定容至1L(用磷酸调pH至2.5～2.8)；流动相B：乙腈。分别经0.45um滤膜抽滤，分别超声脱气。流速：1.0ml/min。柱温：25℃。进样量：20μl。4.高效液相色谱仪操作步骤（1）开机。（2）将流动相按要求装好，设置流动相的体积，拧开Purge阀，以5.0ml/min流速分别对A、B管路排液，排液结束后关闭Purge阀；将流动相比例设为A：95%、B：5%，逐渐将流速增大到1.0