大豆发酵制品中总异黄酮的含量测定.docx

大豆发酵制品中总异黄酮的含量测定【摘要】目的建立一种测定大豆发酵制品——淡豆豉中异黄酮类成分含量的紫外分光光度法分析方法。方法以染料木素为对照品，利用染料木素与氢氧化钠产生反应，在271nm波长处有最大吸收点，用紫外分光光度法测定淡豆豉中总异黄酮的含量。结果淡豆豉中总异黄酮的含量为mg/g，加样回收率为%，相对标准偏差为%。结论方法简便、准确、重现性好,可作为测定淡豆豉中总异黄酮的含量的一种手段，适用于淡豆豉及其它豆制品的日常分析和质量控制。【关键词】大豆淡豆豉氢氧化钠异黄酮分光光度法Abstract：ObjectiveToestablishaUVspectrophotometryfordeterminationofisoflavonesinSemenSojaewasselectedasthereferencesubstance.BasedonthereactionofgenisteinandNaOH,whichhasthemaxiumabsorptionin271nmwavelength,spectrophotometrymethodwasusedfordeterminationofisoflavonesinSemenSojaePraeparatum.ResultsThetotalcontentofisoflavonesinSemenSojaePraeparatumextractswas/gwithmeanrecovery%,andtheRSDwas%.ConclusionThismethodissimple,accurateandreproducible,itcanbeusedfortheroutineanalysisandqualitycontroloftheSemenSojaePraeparatumandfunctionfood.Keywords：Glycinemax(L.);SemenSojaePraeparatum;NaOH;Isoflavones;Spectrophotometry豆豉按微生物种类不同可以分为毛霉型豆豉、曲霉型豆豉、细菌型豆豉和根霉型豆豉［1］。淡豆豉是豆科植物大豆Glycinemax(L.)Merr.的成熟种子与青蒿、桑叶蒸罨、发酵加工而成的制品，发源于中国，是我国的传统食品，也是卫生部确定的第一批药食兼用品种之一。作为常用中药，历版《中国药典》均有记载。因炮制方法的不同，有的性寒，有的微热，有解毒清热、透疹解毒的功效，适用于风热头疼，胸闷呕吐，痰多虚烦等症。淡豆豉中含有的大豆异黄酮(SoybeanIsoflavones)是一类重要的生理活性物质，具有多种生理功能，如降血糖、抗肿瘤作用；对血管的防护作用；雌激素双向调节作用；预防骨质疏松症；较强的抗氧化活性和抗真菌活性等［2,3,4］。其有效成分以大黄素(Daidzein)和染料木素(Genistein)为主［5］，这是一类异黄酮成分。本实验以染料木素作为对照品，利用染料木素与氢氧化钠产生反应，并在271nm波长处产生最大吸收峰的特性，采用紫外分光光度法在271nm波长处测定淡豆豉中异黄酮的含量，建立一种快速、准确测定淡豆豉中总异黄酮含量的新方法。1器材与方法1材料正己烷，天津化学试剂厂产品；无水乙醇，天津化学试剂厂产品；氢氧化钠，河北辛集化工厂产品；染料木素对照品，Sigma公司产品。淡豆豉购自石家庄市乐仁堂药店，经河北医科大学中医学院药用植物教研室严玉平副教授鉴定为正品，留样凭证存放于河北医科大学中医学院药用植物教研室。2仪器λ-2紫外分光光度仪、RE-52A旋转蒸发仪、BS223S电子天平。3样品溶液制备［6］取符合实验要求的淡豆豉，粉碎，过10目筛，精密称取5g。加正己烷40ml超声振荡脱脂25min，弃去正己烷，重复1次。残渣加入50ml70%乙醇溶液，85℃热回流提取3次，1h/次，收集提取液。减压回收溶剂至干，加NaOH溶液溶解，定容为250ml，作为供试品液。精密移取供试品液2ml置100ml量瓶中，加NaOH溶液定容至刻度，摇匀。平行操作3份。4标准曲线绘制精密称取120℃干燥至恒重的染料木素mg，置50ml容量瓶中，加mol/LNaOH溶液定容至刻度，摇匀。精密吸取此溶液，，，，ml分别置于100ml容量瓶中，加mol/LNaOH定容至刻度，摇匀，以mol/LNaOH溶液为空白溶液，在271nm处测吸收度。以吸收度为纵坐标，染料木素浓度(μg/ml)为横坐标绘制标准曲线，结果表明染料木素浓度与吸收度呈良好线性关系。回归方程为Y=8X+9，r=0。5样品测定以mol/LNaOH溶液为空白溶液，在271nm处测吸收度。每个样品重复测定2次。2结果溶剂的选择从染料木素的结构特点及理化性质可知，其具有强疏水性，难溶于水、稀盐酸等，微溶