毛细管气相色谱法测定辛夷药材中桉油精含量.docx

毛细管气相色谱法测定辛夷药材中桉油精含量【摘要】目的建立辛夷药材中桉油精含量的测定方法。方法采用水匀浆破碎，挥发油提取器中回流提取，ＦＦＡＰ毛细管色谱柱分离，火焰离子化检测器检测，以苯乙烯为内标，毛细管气相色谱法测定辛夷药材中桉油精的含量。结果在桉油精进样量为０．４～３．０ｍｇ时有良好的线性关系；加标平均回收率为９９．３％，RSD为１．８％。结论加水匀浆破碎可有效地防止破碎过程中桉油精的挥发。不同产地辛夷药材桉油精含量相差很大。【关键词】辛夷桉油精毛细管气相色谱Abstract：ObjectiveＴｏｄｅｖｅｌｏｐａＧＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃｉｎｅｏｌｉｎＸｉｎｙｉ．MethodsXｉｎｙｉｗａｓｐｕｌｖｅｒｉｚｅｄｗｉｔｈｗａｔｅｒ，ｅｘｔｒａｃｔｅｄａｎｄsｅｐａｒａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃａｐｉｌｌａｒｙｃｏｌｕｍｎＦＦＡＰａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｃｉｎｅｏｌｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｆｌａｍｅｉｏｎｉｚａｔｉｏｎｄｅｔｅｃｔｏｒ.Ｓｔｙｒｅｎｅｗａｓｓｅｌｅｃｔｅｄａｓｔｈｅｉｎｔｅｒｎａｌｓｔａｎｄａｒｄ．ResultsＴｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｏｆｔｈｅｍｅｔｈｏｄｗａｓ０．４～３．０ｍｇ，ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｗａｓ９９．３％，RSDｗａｓ１．８％．ConclusionＴｈｅｒｅｅｘｉｓｔｓｃｏｎｓｉｄｅｒａｂｌｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｃｉｎｅｏｌｉｎＸｉｎｙｉ，wａｔｅｒｓｔｉｒｒｉｎｇａｎｄｐｕｌｖｅｒｉｚｉｎｇｃａｎａｖｏｉｄｔｈｅｖｏｌａｔｉｌｉｔｙｏｆｃｉｎｅｏｌｉｎｔｈｅｓｔｉｒｒｉｎｇｐｒｏｃｅｓｓａｖａｉｌａｂｌｙ．Keywords：Ｘｉｎｙｉ；Ｃｉｎｅｏｌ；Ｃａｐｉｌｌａｒｙｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ辛夷，又名紫玉兰、望春花，属木兰科木兰属落叶乔木［１］，其花蕾入药称辛夷。有散风寒、通鼻窍之功效［２］。辛夷挥发油是一种重要的天然香料，广泛用于医药、日化和香精香料等行业［３］。辛夷挥发油的测定及化学成分的质谱分析已有报道，提取方法有水蒸气蒸馏法［４］、浸膏法［５］、超临界ＣＯ２流萃取法［６］等，以上方法提取辛夷中挥发油时，样品的破碎对桉油精的回收率有很大的影响［４］。桉油精是辛夷挥发油的重要组成部分，国内对辛夷药材桉油精含量测定的相关报道很少，２００５版《中国药典》Ⅰ部附录ⅩＣ给出的桉油精含量测定法使用ＰＥＧ２０Ｍ＋ＯＶ－１７混装气相色谱填充柱，适用于成分不太复杂的药材和中成药中桉油精含量测定。辛夷药材挥发油的成分复杂，《中国药典》的方法不能使与桉油精相邻的峰分离。因此，本实验选用ＦＦＡＰ毛细管柱建立了辛夷药材中桉油精含量的气相色谱内标测定方法，采用匀浆破碎回流提取有效地防止了辛夷药材中桉油精的挥发，确保了测定结果的真实性和准确性。1仪器和材料岛津ＧＣ－１６Ａ气相色谱仪、ＦＩＤ检测器、ＳｅＰｕ３０００色谱工作站；匀浆机，ＦＦＡＰ毛细管色谱柱。辛夷药材由贵阳中医学院提供和鉴定，分别采自河南、广西和贵州。化学对照品桉油精；苯乙烯。其它试剂均为分析纯。2方法与结果对照品溶液的配制准确称取对照品桉油精适量，用甲醇溶解后置于１０ｍｌ容量瓶中，配制成２０ｍｇ／ｍｌ的储备液，精密取出０．０５０ｍｌ储备液于５．０ｍｌ的０．２５ｍｇ／ｍｌ的苯乙烯－三氯甲烷内表液中，加水１ｍｌ，振摇提取０．５ｍｉｎ，离心，下层有机相为对照品溶液。样品溶液的配制取辛夷药材１０ｇ，精密称量于匀浆罐中，加水１５０ｍｌ，匀浆，浆液及洗涤匀浆罐的水一并转移到２５０ｍｌ蒸馏瓶中，加入环己烷５．０ｍｌ，于挥发油提取器［７］中回流提取４ｈ，有机相收集于离心试管中，离心、将上清有机相转入１０ｍｌ容量瓶中，分别用２．５，２ｍｌ环己烷洗用过的提取器收集管和离心试管，离心、将上层有机相一并转入１０ｍｌ容量瓶中用环己烷定容为待测溶液，精密吸取待测溶液０．２５ｍｌ，内标溶液５．００ｍｌ，于１０ｍｌ具塞离心试管中，加水１．０ｍｌ，振摇提取０．５ｍｉｎ，离心，下层有机相为供试品溶液。色谱条件用ＦＦＡＰ毛细管色谱柱；氮气为载气、柱前压８０ｋＰａ；汽化室温度２４０℃；检测器温度２４０℃；柱温：８０℃保留６ｍｉｎ，以４０℃／ｍｉｎ的速率升到２２０℃，保留２ｍｉｎ；以苯乙烯为内标在火焰离子化检测器上测定桉油精含量。根据对照品的保留时间定性，峰面积比计算桉油精的含量。色谱柱和内标物的选择分别用ＳＥ－３０，ＳＥ－５４，ＯＶ－１７０１和大口径、小口径的ＦＦＡＰ毛细管柱进行对照品和样品的测定。结果表明，桉油精在大口径、小口径的ＦＦＡＰ毛细管柱的峰形都很好，但样品经大口径的ＦＦＡＰ毛细管柱分离，有一小峰不能与内标物分开。经各种内标物醋酸乙酯、冰片、萘和苯乙烯比较表明，苯乙烯能与其它峰完全分开且在恰当时间出峰