甘草黄酮提取方法及抗氧化活性研究.docx

甘草黄酮提取方法及抗氧化活性研究【摘要】目的比较不同提取方法对甘草黄酮含量和抗氧化活性的影响。方法采用常规法、超声波、微波、超声-微波协同萃取4种不同提取方法提取甘草黄酮，用分光光度法测定其含量；用活性氧法测定黄酮粗品的抗氧化活性。结果4种方法提取的甘草黄酮含量分别为%，%,%,%。抗氧化活性为常规水浴提取法＞微波提取法＞超声波提取法＞超声-微波协同萃取法。结论超声-微波协同萃取法提取甘草黄酮效果好。4种提取方法所得的甘草黄酮粗品均具有较强的抗氧化作用。【关键词】甘草黄酮超声-微波协同萃取抗氧化性Abstract：ObjectiveTocomparetheeffectofdifferentextractionmethodsonthecontentofflavonoidsandantioxidantactivityfrombathmethod,ultrasonic,microwaveandultrasonic-microwavesynergisticextractiontechnologywereusedintheflavonoidsextraction,andcolorimetrywasusedtodeterminethecontent.Activeoxygencontentwasusedtodetermineitsantioxidantcontentofflavonoidswere:%,%,%,%respectively.Antioxidantactivityofdifferentmethodswere:waterbathextraction＞microwaveextraction＞ultrasonicextraction＞ultrasonic-microwavesynergisticsynergisticextractiontechnologyappliedinextractingflavonoidsfromGlycyrrhizaisbetterthantheothers.Theextractgotfromthefourmethodsallhavegreatanti-oxidation.Keywords：Glycyrrhizaflavonoids；Ultrasonic-microwavesynergisticextraction;Anti-oxidation甘草是豆科植物乌拉尔甘草GlycyrrhizauralensisFisch.、胀果甘草Bat.或光果甘草的干燥根和根茎，是临床最常用的中草药品种［1］，其主要有效成分为甘草酸和甘草黄酮。据报道，甘草黄酮是一类生物活性较强的物质，有抗溃疡、抗菌、抗炎、解痉、降血脂、镇痛等作用［2］，傅乃武等［3］证实甘草中的黄酮类成分有明显的抗氧化作用；1986年以来还发现甘草黄酮具有防治艾滋病的功效。对甘草黄酮的研究越来越引起人们的注意和重视。本研究以新疆地产乌拉尔甘草为研究材料，利用4种不同的方法提取甘草黄酮，并采用活性氧法［4］在Rancimat743食用油氧化稳定性测定仪中测定黄酮粗品的抗氧化活性，为进一步开发利用甘草优势资源提供理论依据。1器材1材料乌拉尔甘草，洗净，烘干，粉碎，用70%乙醇提取后，浓缩，干制，得甘草粗黄酮粉。食用油，购于市场。2试剂芦丁对照品(中国药品生物制品检定所)；乙醇；硝酸铝；氢氧化钠；亚硝酸钠，均为分析纯。3仪器Sartorious电子天平；超声-微波协同萃取仪；WTS03-1微波提取设备；超声波清洗器；T6-紫外可见分光光度计；Rancimat743食用油氧化稳定性测定仪；RE52-A旋转蒸发仪。2方法甘草黄酮的定量测定方法对照品溶液的制备精密称取120℃干燥至恒重的芦丁对照品mg，加适量70%乙醇在水浴微热溶解，放冷后转移至250ml容量瓶中，加70%乙醇稀释至刻度，摇匀，配成浓度为mg·ml-1的标准品溶液，备用。最大吸收峰的确定精确吸取芦丁对照品溶液2ml，加70%的乙醇至5ml，然后加入5%的NaNO2溶液1ml，室温放置6min，再加入10%的Al(NO3)31ml，混匀，室温放置6min，加入4%的NaOH10ml,用水稀释至25ml，混匀，放置15min，在分光光度计上扫描波长从400～600nm之间的吸收度,结果在510nm波长处有最大吸收值。标准曲线的绘制精确吸取芦丁对照品溶液0，1，2，3，4ml，分别加70%的乙醇至5ml，然后加入5%的NaNO2溶液1ml，室温放置6min，再加入10%的Al(NO3)31ml，混匀，室温放置6min，加入4%的NaOH10ml,用水稀释至25ml，混匀，放置15min，以不加样品的溶液为参比液，在510nm处测定其吸光度值。测定结果计算得直线方程：A=7C+2，r=6。不同方法提取甘草黄酮及