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CTC染色主要内容一、分子荧光的产生1.2影响荧光的因素1.溶剂的影响除一般溶剂效应外,溶剂的极性、氢键、配位键的形成都将使化合物的荧光发生变化2.温度的影响荧光强度对温度变化敏感,温度增加,外转换去活的几率增加3.溶液pH对酸碱化合物,溶液pH的影响较大,需要严格控制二、微生物研究中常用的荧光探针1、膜通透性(membraneintegrity)2、代谢活性(metabolicactivity)3、膜电位(membranepotential)4、酯酶活性(esteraseactivity)5、pH梯度(pHgradient)6、其它1、膜通透性(membraneintegrity)BacLightLive/Dead(PI/SYTO9)链霉菌不同发酵时期:菌丝活性及内部结构2、代谢活性(metabolicactivity)Example2:StainingofStreptomycessp.withCTC3、酯酶活性(esteraseactivity)荧光染料作为底物由酯酶所水解产产生荧光分子4、膜电位(membranepotential)5、pH荧光探针Probe三、激光扫描共聚焦显微镜MoreColorPossibilities4.Three-DimensionalReconstructionofSpecimen(三维重构)Example3:Comparisonofconfocalmicroscopywithfluorescentmicroscopy样品的3D-重建激光扫描共聚焦显微镜主要功能四、激光扫描共聚焦显微镜在微生物研究中的应用链霉菌Streptomycesantibioticus的生长分化4.2共聚焦在真菌研究中的应用1、真菌浸染机制的研究2、真菌发育分化的研究3、真菌生长的研究4、真菌活性的研究(FDA/PI)5、真菌的原位研究6、真菌细胞融合的研究7、一些机制的研究,如胞吞等4.3微生物的群落分析1、环境中微生物的分布及活性的原位分析(光学切片功能)2、食品污染分析1、荧光原位杂交研究(Insituhybridization)2、生物膜的研究(bioflim)3、细菌在植物根部的定植研究4、细菌的活性分析5、抗菌分析实验:激光扫描共聚焦显微基本步骤感谢您的关注!欢迎相互交流!