电镜细胞化学技术省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx

电镜细胞化学技术电镜细胞化学技术酶细胞化学发展情况酶细胞化学意义细胞器酶细胞化学基本原理一、水解酶二、氧化还原酶氧化酶脱氢酶惯用酶细胞化学试验步骤惯用固定剂对超微结构和酶活性保留情况应用免疫电子显微技术电镜免疫细胞化学技术对标识物要求基本操作包埋前染色包埋后染色超薄冰冻切片染色免疫电镜胶体金标识法优点操作步骤包埋后染色应用组织内雌激素受体CG-HRP-E2标识技术雌激素受体(ER)除存在于性器官外，几乎在全身器官或多或少存在。对对应组织进行ER定性、定量检验，对研究疾病发生、发展、诊疗和治疗都有主要意义。有生化法、组化法、组化免疫法及新近发展起来单克隆抗体，已经有学者对这些方法进行评价。最近有作者用辣根过氧化物酶(HRP)偶联雌二醇(E2)检测乳腺癌水平，并广泛地得到应用。上述方法均缺乏准确定性和定量研究南医大电镜室首次将胶体金(CG)与HRP偶联E2结合作为配体形成了CG-HRP-E2，使ER在电镜下显示，可在细胞超微结构水平进行定位和定量分析。结果讨论细胞形态立体计量学细胞形态立体计量学意义超薄切片取得图像存在以下问题细胞一些结组成份体积相对测量体密度面分析、线分析、点分析二、面密度（Surfacedensity）表示膜面积相对多少量，用Sv表示曲线长度（Lengthofcurve）膜在二维图像上显示为曲线，普通而言，曲线形状是不规则，用图像分析仪能够测出曲线长度；如没有图像分析仪，可用一组平行等距测试线测出。