分析化学21省公开课一等奖全国示范课微课金奖PPT课件.pptx

分析化学70年代快速发展不挥发有机物约占70%80年代以来HPLC文件量21%（89年）仪器销售量25%（12亿）（89年）应用领域拓展（化工、环境保护、临床、药品、生命）超出GC第21章高效液相色谱法High-PerformanceLiquidChromatography，HPLC第21章高效液相色谱法High-PerformanceLiquidChromatography，HPLC第21章高效液相色谱法21-1高效液相色谱仪单柱塞泵结构示意图HPLC与GC比较a.柱长:10—50cm内径:2—5mm微柱◎填充柱微HPLC柱0.5~1.0mm毛细管HPLC柱100~500μm纳级HPLC柱10~100μm◎拉制HPLC柱50~200μm◎开管HPLC柱5~10μm微柱优越性：1、消耗少（样、流动相、固定相）2、灵敏（溶质在柱上稀释比下降）3、分离效率高（可装长柱）4、操作条件易选择5、其它分离联用易b、检测系统惯用UV光度检测（包含它当代方法）引人注目：荧光检测选择性10-9~10-11g/ml质谱检测通用性10-8g/ml蛋白质分析生物质谱C、梯度林洗装置作用：让流动相组成随时间而改变，以调整流动相极性、离子强度或pH，使样品组分相对保留值得以改变，从而提升分离效率。与GC程序升温技术比较1、固定相分类材料刚性(刚性固体、硬质凝胶）固相填料疏松（薄壳型微珠载体，全多孔型载体）形状（球形、无定形）2、流动相选择溶剂要求1分配色谱（LLC）2吸附色谱（LSC）3键合相色谱4离子交换色谱5离子对色谱6凝胶渗透色谱分离原理分离类型选择正相色谱与反相色谱概念4离子交换色谱离子交换平衡式可用下式表示：R－Br+AR－Ar+B5离子对色谱正相离子对分配色谱：水溶液作为固定液，对离子存在于含水固定相中，有机溶剂为流动相.1、超临界流体指物质在高于临界点，即高于其临界压力和临界温度时一个物态。相图SLG第21章高效液相色谱法21－4超临界流体色谱超临界流体色谱（SFC）特点※比HPLC含有更高分离效率。※SFC使用温度较低，能够分离热稳定性差、高分子量化学物。※SFC还能够与GC和HPLC大多数通用型或选择型检测器相匹配。3、仪器3、应用超临界流体特殊性，使得它有自己特点，是GC和HPLC主要补充，它能够分离分析气相色谱和高效液相色谱难以分离检测组分，或使分离分析更为方便和有效。超临界流体色谱法被广泛地应用于聚合物、油脂类物质、环境样品、天然产物、药品等物质分离分析。《高效液相色谱法》结束