基因工程载体植物基因工程优品文档.ppt
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基因工程载体植物基因工程LacZ基因编码β-半乳糖苷酶,能催化无色的X-gal生成蓝色化合物。抗生素的主要生产者,分子遗传相对操作简便,不产内毒素可产生含外源片断的单链DNA分子。含有大肠杆菌-半乳糖酶基因(lacZ)的启动子及其编码-肽链的DNA序列,即lacZ’基因。启动子、分泌信号序列、终止子等能承载比较大的外源DNA片段;在lacZ’基因中靠近5’端的一段有MCS区段,但并不破坏该基因的功能。β-半乳糖苷酶基因(lacZα和lacZβ)pUC18/19,pBR322等酵母染色体的着丝粒序列但它
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基因工程载体载体类型基因工程所用的载体都经过人工重新构建克隆载体与表达载体克隆载体:携带外源DNA进入受体细胞并使外源DNA大量扩增。表达载体:表达外源基因编码的蛋白质,载体克隆位点的上游应含有启动子,下游含有转录终止序列。第一节.质粒野生型质粒的大小一般在2-200Kb基因工程常用者在2-4Kb之间质粒并不是细菌生长所必须的,但可为宿主执行一定的遗传功能,如抗生素的抗性、重金属离子的抗性、细菌毒素的分泌等。质粒(plasmid)1.质粒类型:严紧型质粒(stringentplasmid)1-5个拷贝/细
基因工程的载体和受体优品文档.ppt
基因工程的载体和受体一、用于基因克隆的载体5学时)3.载体应具备的条件(characteristicsofvector)质粒(plasmid)噬菌体或病毒DNA考斯质粒(cosmid)与噬菌粒人造染色体载体(一)质粒(plasmid)(1)质粒的自主复制性(2)质粒的不相容性(incompatibility)质粒不相容的分子机制(3)质粒的可转移性(4)携带特殊的遗传标记3.几种代表性质粒最初发现于痢疾志贺氏菌(Shigelladysenteriae),后来发现还存在于Salmonella、Vibrio、
基因工程载体构建蛋白表达优品文档.ppt
基因工程载体构建蛋白表达载体构建与蛋白表达真核细胞与原核细胞的比较原核细胞与真核细胞的区别原核表达与真核表达的区别乳糖操纵子学说(原核基因的表达调控)真核细胞的复制、转录、翻译mRNA剪切利用受体菌蛋白的特异性抗体、配体或底物亲和层析等技术,较容易地分离融合蛋白,然后通过蛋白酶水解,特异性裂解外源目的蛋白与受体菌蛋白之间的肽键,最终得到外源目的蛋白。信号肽N端的最初几个氨基酸为极性氨基酸,中间和后部氨基酸为疏水性氨基酸。分泌信号序列---引导分泌蛋白从胞内到胞外,并对蛋白质翻译后加工起作用。Theprom
基因工程第三章基因工程的载体优品文档.ppt
基因工程第三章基因工程的载体第三章基因工程的载体载体(Vector)基因克隆载体(genecloningvector):能承载外源基因,将其带入受体细胞得以稳定维持的DNA分子。载体的功能(FunctionofVector)运送外源基因高效转入受体细胞。为外源基因提供复制能力或整合能力。为外源基因的扩增或表达提供必要的条件。多克隆位点(multiplecloningsite,MCS)(1)针对受体细胞的可转移性;(2)自主复制功能;(3)显著的筛选标记;(4)特定的多克隆位点;(5)安全性;载体分类:1)