生命的奥秘基因治疗专家讲座.pptx

生命奥秘AJourneyintoLife基因治疗基因治疗基本概念基因治疗发展历程基因治疗策略基因治疗流程基因治疗应用约3万个基因“bubbleboy”基因治疗案例分析成功案例SCID患者ADA缺失ADA缺点→→脱氧腺嘌呤核苷酸代谢受阻→dATP↑ATP↑→抑制核糖核苷还原酶活性→阻止DNA复制和修复→T、B淋巴细胞增殖障碍。年AshantiDeSilva21岁，仍生存良好策略：将淋巴细胞ADA酶恢复至正常5-10%，维持免疫系统功效，改进病人症状。为何选择ADA缺点症？一、基因治疗基本概念基因治疗基本标准生殖细胞(germline)基因治疗二、基因治疗发展历程1980年，人β地中海贫血患者基因治疗，没取得好疗效，也无不良反应。1989年，首个获批基因治疗，将细菌新霉素抗性基因neoR导入肿瘤浸润淋巴细胞，回输患者体内，细胞存活了两个月。2.狂热期：1990年-1995年法国巴黎奈克儿童医院费舍尔博士与卡波博士也对两例先天性免疫功效不全患儿成功地进行了基因治疗。中国第一例基因治疗3.理性期：1996年-至今载体安全性Wilson第三代腺病毒相关表示载体世界首个上市基因治疗产品基因治疗现实状况疾病种类年9月16日3654例基因治疗临床试验三、基因治疗策略1.基因置换基因置换2.基因添加将“自杀”基因导入靶细胞基因表示酶能使药品前体转化为细胞毒性代谢物，杀死靶细胞导入自杀基因抑制某个基因表示，或者经过破坏某个基因而使之不表示，以到达治疗疾病目标。基因缄默技术反义寡聚核苷酸（І类）与mRNA特异性结合，阻断翻译过程四、基因治疗流程1.选择治疗基因易取和移植。血细胞、肌细胞；寿命长；易受外源基因转化；转染细胞培养后回输，易成活。当前惯用靶细胞造血细胞皮肤成纤维细胞肝细胞血管内皮细胞淋巴细胞肌肉细胞肿瘤细胞3.载体选择酶切后目标基因片段基因克隆基本步骤病毒介导基因转移系统逆转录病毒生活史RNA去向env,pol,gag为活病毒所需基因载体构建时剔除，只保留Ψ包装信号包装细胞需稳定表示病毒结构蛋白LTR4.将目标基因导入脂质体介导基因转移示意图基因治疗路径基因治疗两种路径5.靶细胞回输基因治疗应用腺苷脱氨酶(ADA)和嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)缺乏症珠蛋白生成障碍性贫血和血红蛋白病血友病和其它血浆蛋白缺乏症苯丙酮酸尿症和其它先天性代谢缺点病莱-纳(Lesch-Nyhan)综合征家族性高胆固醇血症囊性纤维化病年11月3日，欧盟同意首个基因治疗药品Glybera脂蛋白脂肪酶缺乏症（发病率～1/100万）。接收一次治疗后，可显著降低致死性急性胰腺炎发病率。荷兰UniQure研制，花费将高达125万欧元。，11月6日，FDA同意SparkTherapeutics基因治疗产品SPK-RPE65。利伯氏黑蒙症（Leber’scongenitalamaurosis）RPE65基因突变致视网膜营养不良致盲。21病人能够对感觉到光，几位经三年治疗已复明。治疗费用$100,000/位。视网膜退化小鼠模型里。将视紫红质光敏蛋白表示在双极细胞中。利用双极细胞来看到外面世界。，9月10号，FDA经过了血友病B型（缺乏凝血因子IX）肿瘤是一类多步骤、多基因突变疾病，这些基因主要是编码调控细胞周期各种蛋白因子基因。导入抑癌基因抑制过分表示癌基因导入免疫增强基因(细胞因子、共刺激分子)导入抑制血管生成基因(endostatin等)导入自杀基因p53——基因组卫士RNAi作用机制肿瘤相关基因调控网络microRNA(miRNA)是一组由基因组编码长度约20～23个核苷酸非编码RNA，经过和靶基因mRNA碱基配对引导缄默复合体(RISC)降解mRNA或妨碍其翻译。miRNA生物合成miRNAsAffectEverythingmiRNAsasOncogenesandTumorSupressorsNatureMed11(7):713-714,.DetaoWang,etal.miR-150,p53proteinandrelevantmiRNAsconsistofaregulatorynetworkinNSCLCtumorigenesis.OncolRep;30(1):492-498.英国AdaptimmuneTherapeutics多发性骨髓瘤、黑色素瘤、肉瘤和卵巢癌很好。T细胞表示识别癌细胞抗体识别B细胞白血病/瘤抗CD19单链抗体魏则西生前在西安电子科技大学读大二。滑膜肉瘤晚期9月7日，90后女演员徐婷因患淋巴瘤在北京香消玉殒，她生命轨迹永远定格在26岁。据最终为她治疗解放军总医院第一从属医院血液科主任吴晓雄介绍，徐婷最终被确诊为淋巴瘤当中恶性程度极高T淋巴母细胞淋巴瘤。徐婷得知自己罹患淋巴瘤之后，因为恐惧化疗，求援于伪中医针灸、刮痧、拔罐、放血之类奇葩疗法。8月底病情快速恶化