橙皮中橙皮苷的含量测定方案设计.pdf

橙皮中橙皮苷的含量测定方案设计一、前言橙皮苷别名叫川陈皮素，分子式为C28H32O15。橙皮苷在医药工业中用途较广，是多种药物的主要原料之一，比如中成药物“脉通”的主要原料之一便是它；在食品和工业生产中橙皮苷可以当成天然的抗氧化剂来使用，防止或缓解食品因被空气中的氧气氧化而变质，提高了食品的稳定性，从而延长了食品的保存期。同时也可用于化妆品和美妆行业中：橙皮苷素具有维生素的功效及功能，它可以用于皮肤护理产品中；橙皮苷具有预防冻伤及防止紫外线辐射的作用，可以制成冻伤膏或者防晒产品。除此之外，橙皮苷还能抗炎症和抗病毒，具有一定的抗菌作用，在口腔卫生制品使用能抑制齿斑的生成并同时减少口臭，例如牙膏中加有橙皮苷。橙皮苷它属于维生素类药，能维持毛细血管的渗透压，多用于缩短毛细血管的出血时间，降低毛细血管的脆性使其富有弹性，对毛细血管产生保护作用，防止微血管破裂导致出血对身体造成磨损伤害，常作为心肌梗塞与高血压的治疗药物。橙皮苷应在密封、干燥处保存。二、设计依据（一）根据《中国药典》2015年版二部说明，橙皮苷为灰黄色跟黄色粉末，或者是结晶性粉末；没有臭味跟异味。它可以在试剂名为二甲基亚砜的液态溶液中，与二甲基亚砜混合成为一个状态的均匀相，同时它在不含杂质的水中、甲醇（化学反应式为CH3OH）溶液或乙醇（化学反应式为C2H5OH）中不会混合成为一个状态的均匀相；在0.1mol/LNaOH溶液中非常微小的产生混合，但在0.1mol/LHCl溶液中几乎不溶解。（二）本方案测定橙皮苷含量时，由于橙皮苷热稳定性差以及容易挥发，考虑到高效液相色谱法相比于气相色谱法应用范围广；流动相种类多，可通过流动相的优化达到高的分离效率；一般在室温下分析即可，不需高柱温。所以本方案选定高效液相色谱法（HPLC法），以甲醇作为流动相，十八烷基键合相（ODS）为色谱柱，检测波长为UV248nm，采用外标一点法测定橙皮苷的含量。三、设计方案（一）高效液相色谱法（HPLC法）原理高效液相色谱法测含量是利用高压输液泵在高压下连续不断地将流动相送入到色谱系统，在装有填充剂的色谱柱内对供试品进行分离测定的色谱方法。注入的供试品溶液，随流动相进入色谱柱，各组分在柱内得到分离，随后进入检测器检测，由记录仪数据处理机记录和处理色谱信号。HPLC由高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录及数据处理系统组成。高压输液系统：由高压输液泵和梯度洗脱装置组成，其作用是在高压下将流动相不断地输送入色谱系统，保证流动相的正常工作。流动相在使用前要经过处理，并通过在线脱气机进行脱气。由于流动相在常压下混合，通常会溶解一些气体，会给测定结果带来不良的影响，使用前必须利用在线脱气机对流动相进行在线脱气。如不进行脱气，气体进入泵体会妨碍柱塞和单向阀的正常工作，会影响组分保留时间和峰面积的重现性；气体如进入检测器，会引起电信号和光吸收的变化，会造成基线漂移。溶解的气体有可能会引起溶剂pH的变化。进样系统：主要是由进样器构成，是将试样导入色谱柱的装置，安装在色谱柱的入口处。目前常用的是高压进样阀，常用六通阀，具有进样量准确，重复性好等特点。分离系统：包括色谱注、柱温箱，连接管线等部件。色谱柱是高效液相色谱仪的最重要部件之一，色谱柱要具有分离效率高、柱容量大、分析速度快等特点。检测器：是高效色谱仪的关键部件，应具有高灵敏度、线性范围宽、低噪音、重复性好，适应性广等特点。常用的检测器有包紫外检测器(UVD)、荧光检测器(FLD)、示差折光检测器(RID)、电化学检测器(ECD)。（二）色谱条件色谱柱C18，APCELLPAK流动相甲醇;(乙腈20ml+冰乙酸50ml+水630ml)=30:70流速0.8ml/min波长248nm温度40℃进样量5ul维持时间21min（三）橙皮苷成品鉴别：仪器与试剂1.试验用仪器：烘箱，硅胶薄层板，紫外灯。2.试验试剂：甲醇，二甲基亚砜，乙醇，无水甲醇。3.操作步骤：(1)取样约50毫克，加二甲亚砜溶液1毫升，溶解，用甲醇溶液稀释到25毫升，摇晃均匀后，作为样品。取对照品50毫克,加二甲亚砜溶液1毫升，溶解，用甲醇溶液稀释到25毫升，摇晃均匀后，作为对照品(2)取对照品和样品各10微升，分别在同一个硅胶制成的薄层板上用展开剂进行铺平展开处理，处理好后取出进行晾干备用。展开剂配置方法：水：乙醇：无水甲酸=10:9:1(3)用显色剂喷匀后，放置105℃中5min，取出在紫外灯（365nm）下观察，结果应该与对照组相同。（四）橙皮苷干燥失重：1.试验用仪器：分析天平（精度为十万分之一）、烘箱、称量瓶。2.操作步骤：取混合均匀的供试品，用研钵切碎研磨成2mm以下的小颗粒，取约1g精密称定，平铺于扁形称量瓶中，扁形称量瓶需要与供试品在相同的条件反复干燥直至恒重，厚度不宜超过5mm