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急性呼吸窘迫综合征【理论复习】【定义】【病因】【试验目标】【试验动物】【试验分组】1.称重2.固定:背部交叉仰卧位固定3.统计呼吸曲线:张力换能器BL-410系统4.给药:耳缘静脉注入,油酸组(0.2ml/kg油酸、迟缓、2分钟注射完),生理盐水组(0.2ml/kg生理盐水)5.给药后统计家兔呼吸情况,1小时后处死家兔6.在甲状软骨下缘2-3cm行颈部正中切口,分离气管后夹闭并游离气管和食道,开胸,小心取出心脏和肺,细心剪去食管、心脏及肺门周围组织,观察肺外观,并称重计算肺系数肺系数=肺重(g)/体重(kg)7.肺泡灌洗(bronchoalvagelavage,BAL)方法:将橡皮管插入气管后用线固定,然后用注射器将10ml生理盐水正压迟缓注入肺内,重复抽吸三次,回收灌洗液,灌洗液于3000rpm/min,离心15min,细胞沉淀用1ml生理盐水重悬8.取10ul重悬液抹片,染色,显微镜下观察细胞细胞种类【注意事项】【试验结果】推片→染色→显微镜下观察并描述涂片推片:取一滴重悬细胞液置于载玻片一端,左手持载玻片,右手以边缘平滑推片一端从悬液前方后移接触悬液,悬液即沿推片散开。然后按推片与载片夹角保持30-45度平稳地向前移动,载片上保留下一层薄膜,涂片制成后可手持玻片在空气中挥舞,使细胞膜快速干燥,以免细胞皱缩染色:取几滴瑞士染色液加在涂片上,2分钟后,用自来水洗净,将玻片风干涂片观察:显微镜下观察涂片,对比描述细胞数目和细胞种类正常大鼠肺切片HE染色【讨论】