一种制备知母皂苷N的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105440098A(43)申请公布日2016.03.30(21)申请号201511030437.0(22)申请日2015.12.31(71)申请人南京中医药大学地址210023江苏省南京市栖霞区仙林大道138号南京中医药大学唐仲英科技楼505B室(72)发明人杨小林吴皓(74)专利代理机构南京天华专利代理有限责任公司32218代理人李晓峰徐冬涛(51)Int.Cl.C07J71/00(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图2页(54)发明名称一种制备知母皂苷N的方法(57)摘要本发明公开一种制备知母皂苷N的方法，包括如下步骤：(1)以知母药材为原料，加入溶剂进行溶剂提取得到提取液；(2)将步骤(1)中得到的提取液预处理后，采用树脂吸附法、聚酰胺层析法、反相ODS柱层析法和SephadexLH-20柱层析法中的任意一种或至少两种进行组合的方式洗脱分离；(3)合并步骤(2)中的洗脱液，并进行干燥得到知母皂苷N。该发明中知母皂苷N的制备方法相对简单，所得知母皂苷N的得率与现有技术相比具有显著的提高，向工业化生产更迈进了一步。CN105440098ACN105440098A权利要求书1/1页1.一种制备知母皂苷N的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)以知母药材为原料，加入溶剂进行溶剂提取得到提取液，所述的溶剂选自水、甲醇、乙醇、丙酮和丙醇中的任意一种或至少两种的混合液；(2)将步骤(1)中得到的提取液预处理后，采用树脂吸附法、聚酰胺层析法、反相ODS柱层析法和SephadexLH-20柱层析法中的任意一种或至少两种进行组合的方式洗脱分离，洗脱分离过程中选用水、丙酮、乙腈、甲醇、乙醇和丙醇中的任意一种或至少两种的混合液作为洗脱剂；(3)合并步骤(2)中的洗脱液，并进行干燥得到知母皂苷N。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的溶剂为水、丙酮水溶液、乙醇水溶液、乙腈水溶液、甲醇水溶液或丙醇水溶液，优选为水、丙酮水溶液或乙醇水溶液；所述溶剂提取的方式为回流、渗滤或超声提取。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述乙醇水溶液的体积百分含量为10％～95％，所述丙酮水溶液的体积百分含量为10％～95％。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中采用树脂吸附法与聚酰胺层析法、反相ODS柱层析法和SephadexLH-20柱层析法中的任意一种进行组合的方式洗脱分离；优选的，采用树脂吸附法与反相ODS柱层析法进行组合的方式洗脱分离。5.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于：所述树脂吸附法采用的树脂为聚苯乙烯型大孔吸附树脂，洗脱剂为水、丙酮水溶液、乙醇水溶液和丙醇水溶液中的至少一种，所述洗脱的方式为等浓度洗脱或梯度洗脱。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤(2)中所述预处理的方式为将提取液调整浓度后离心取上清液或过滤，所述的树脂吸附法为将提取液的离心上清液或过滤液通过大孔树脂吸附后加洗脱剂进行洗脱分离，所述洗脱分离的过程为：先用水洗脱除杂，再用5％～30％的丙酮水溶液、乙醇水溶液或丙醇水溶液洗脱除杂，最后再用20％～95％的丙酮水溶液、乙醇水溶液或丙醇水溶液洗脱。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述洗脱分离的过程为：依次用2～8BV的水、2～8BV的30％乙醇水溶液洗脱除杂，再用2～8BV的50％乙醇水溶液洗脱。8.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于：所述反相ODS柱层析法、聚酰胺层析法和SephadexLH-20柱层析法的洗脱剂为含水乙腈、含水丙酮、含水乙醇和含水甲醇中的至少一种，洗脱方式为等浓度洗脱或梯度洗脱。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述的洗脱剂为体积百分含量为20％～90％的含水乙腈、含水丙酮、含水乙醇或含水甲醇。10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：所述反相ODS柱层析法的洗脱剂为体积百分含量为30％～70％的含水丙酮或含水甲醇，其洗脱方式为等浓度洗脱。2CN105440098A说明书1/5页一种制备知母皂苷N的方法技术领域[0001]本发明涉及植物提取物的制备方法，具体涉及一种从中药知母中提取分离的单体成分知母皂苷N的方法。背景技术[0002]知母皂苷N是中药材知母中的有效成分，其化合物分子式为C45H76O30，分子量为936，化学名为(25S)-26-O-β-D-吡喃葡糖基-22-羟基-5β-呋甾-2β,3β,26-三醇-3-O-β-D-吡喃葡糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷。结构为：[0003][0004]现有技术中，对于知母皂苷N的提取分离方法已有如下报道：马百平报道了知母皂苷N的分离过程(知母中的两种新呋甾皂苷，药学学报，2006，41(6)：527-