测定糖化血红蛋白的试剂盒及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108287245A(43)申请公布日2018.07.17(21)申请号201810095525.6(22)申请日2018.01.31(71)申请人迈克生物股份有限公司地址611731四川省成都市高新区百川路16号(72)发明人甘萍萍耿英利黎明吴昌英龙腾镶(51)Int.Cl.G01N33/72(2006.01)权利要求书2页说明书13页(54)发明名称测定糖化血红蛋白的试剂盒及其制备方法(57)摘要本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种糖化血红蛋白测定试剂盒,该试剂盒包括试剂R1和试剂R2，试剂R1包含胶乳、双缓冲液、表面活性剂；试剂R2包含糖化血红蛋白单克隆抗体、双表面活性剂、缓冲液，该试剂盒测定准确度高、成本低、稳定性好。CN108287245ACN108287245A权利要求书1/2页1.一种用于测定糖化血红蛋白的试剂盒，其包含试剂R1及试剂R2，其中所述试剂R1包含胶乳，缓冲液A，及表面活性剂A；且其中所述试剂R2包含糖化血红蛋白抗体，表面活性剂B，及缓冲剂B；其中所述缓冲液A包含选自下组的任意二种组分：甘氨酸，硼酸盐，Tris，磷酸盐，所述表面活性剂B为吐温系列表面活性剂+聚氧乙烯烷基醚型非离子表面活性剂。2.权利要求1的试剂盒，其中所述试剂R1的pH值为5-9。3.权利要求1或2的试剂盒，其中所述吐温系列表面活性剂选自下组：吐温20、吐温21、吐温40、吐温60、吐温61、吐温80、吐温81、和吐温85。4.权利要求1或2的试剂盒，其中所述聚氧乙烯烷基醚型非离子表面活性剂选自下组：聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯十二烷基醚、聚氧乙烯十六烷基醚、和二苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚。5.权利要求1-4任一项的试剂盒，其中所述试剂R1中的胶乳粒径为50nm-200nm。6.权利要求1-4任一项的试剂盒，其中所述R1还包含防腐剂。7.权利要求1-6任一项的试剂盒，其中所述试剂R2的pH值为4-9。8.权利要求1-7任一项的试剂盒，其中所述试剂R2还包含如下的一种或多种：保护剂、蛋白稳定剂、无机盐、防腐剂、螯合剂。9.一种用于测定糖化血红蛋白的试剂盒，所述试剂盒包含R1和试剂R2，其各自包含如下组分：试剂R1：试剂R2：2CN108287245A权利要求书2/2页10.一种用于测定糖化血红蛋白的试剂盒，所述试剂盒包含R1和试剂R2，其各自包含如下组分：试剂R1：试剂R2：3CN108287245A说明书1/13页测定糖化血红蛋白的试剂盒及其制备方法技术领域[0001]本发明属于糖化血红蛋白检测技术领域，具体涉及一种糖化血红蛋白检测试剂盒。背景技术[0002]糖化血红蛋白(HbAlc)是血红蛋白与血液中葡萄糖结合而成的产物，其数值与血糖浓度成正比，且为不可逆的结合，随红细胞消亡而消失(红细胞的生命期120天左右)。由于糖化血红蛋白与红细胞寿命和平均血糖水平相关，其是评价糖尿病患者长期血糖控制较理想的指标，可反映过去2～3个月的平均血糖水平，不受每天血糖波动的影响。与微血管和大血管并发症的发生关系密切。糖化血红蛋白水平升高，糖尿病视网膜病变、肾脏病变、神经病变、心血管事件发生风险均相应增加。糖化血红蛋白对糖尿病发生有较好的预测能力。[0003]目前，临床上测定HbA1c的方法有很多，较常用的是HPLC、胶乳免疫比浊法、酶法等。HPLC法是测定HbA1c的金标准，该法快速、准确、简便，但需要特殊的仪器且仪器、试剂昂贵，测试成本较高，很难在基层医院实验室开展。亲和层析法耗时前处理较为麻烦，耗时较长；酶法检测精密度较差；胶乳免疫比浊法不需要特殊仪器，可在生化仪上与其他生化项目一同检测，单位时间内通量大，且测试成本比HPLC法低，适用于批量检测。[0004]目前市面上胶乳试剂是传统的三试剂，试剂1为空白胶乳颗粒，试剂2为糖化血红蛋白(HbA1C)的单克隆抗体，试剂3为对应二抗羊抗鼠IgG抗体。因为单抗和二抗形成的免疫复合物长期保存稳定性较差，逐渐失活导致测定信号下降，所以在使用前操作人员需将试剂2和试剂3混合，操作繁琐，且混合后的试剂稳定效期较短。[0005]同时，由于胶乳免疫比浊法测定结果是测定HbA1c占总Hb蛋白的含量，因此在检测中重度贫血样本时易受影响，使检测结果偏低。发明内容[0006]针对上述问题，本发明提供了一种双试剂糖化血红蛋白检测试剂盒及其制备方法，来取代传统的包含三种试剂的检测试剂盒。本发明解决了前述操作繁琐和试剂不稳定的问题，以及中重度贫血样本测值偏低的问题。[0007]具体而言，本发明提供了一种用于测定糖化血红蛋白的试剂盒，其包含试剂R1及试剂R2，其中所述试剂R1包含胶乳，缓冲液A，及表面活性剂A；且其中所述所述试剂R2包含糖化血红蛋白抗体，表面活性