一种用于检测人类EGFR基因突变的序列组合物及其试剂盒.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108949927A(43)申请公布日2018.12.07(21)申请号201810942602.7(22)申请日2018.08.17(71)申请人上海迈景纳米科技有限公司地址200030上海市徐汇区虹桥路333号3幢573室(72)发明人徐高连徐宏古宏晨(74)专利代理机构上海旭诚知识产权代理有限公司31220代理人郑立(51)Int.Cl.C12Q1/6858(2018.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书1页说明书9页序列表5页附图2页(54)发明名称一种用于检测人类EGFR基因突变的序列组合物及其试剂盒(57)摘要本发明公开了一组用于检测人类EGFR基因突变的引物序列和blocker序列，涉及EGFR基因突变的检测。本发明还进一步公开了包括该引物序列和blocker序列的试剂盒及使用方法。本发明提供的检测人类EGFR基因突变引物序列和blocker序列可在单一反应中检测多种不同类型的突变基因，灵敏度高，特异性强，单次检测通量高。CN108949927ACN108949927A权利要求书1/1页1.一种用于检测人类EGFR基因突变的序列组合物，其特征在于，所述序列组合物包括SEQIDNO:1、SEQIDNO:2和SEQIDNO:3。2.如权利要求1所述的用于检测人类EGFR基因突变的序列组合物，其特征在于，所述序列组合物还包括SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7和SEQIDNO:8。3.如权利要求2所述的权利要求1所述的用于检测人类EGFR基因突变的序列组合物，其特征在于，所述序列组合物还包括SEQIDNO:9、SEQIDNO:10、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14和SEQIDNO:15。4.如权利要求3所述的权利要求1所述的用于检测人类EGFR基因突变的序列组合物，其特征在于，所述序列组合物还包括SEQIDNO:16、SEQIDNO:17和SEQIDNO:18。5.如权利要求4所述的权利要求1所述的用于检测人类EGFR基因突变的序列组合物，其特征在于，所述序列组合物还包括SEQIDNO:19、SEQIDNO:20和SEQIDNO:21。6.如权利要求5所述的权利要求1所述的用于检测人类EGFR基因突变的序列组合物，其特征在于，所述序列组合物还包括SEQIDNO:22、SEQIDNO:23和SEQIDNO:24。7.如权利要求6所述的权利要求1所述的用于检测人类EGFR基因突变的序列组合物，其特征在于，所述序列组合物还包括SEQIDNO:25、SEQIDNO:26和SEQIDNO:27。8.一种用于检测人类EGFR基因突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1-7任意一项所述的序列组合物。9.如权利要求8所述的检测人类EGFR基因突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括用于PCR扩增的反应体系。10.一种用于检测人类EGFR基因突变的方法，其特征在于，所述方法利用如权利要求8所述的试剂盒进行检测，所述检测方法分为3个不同的检测体系，其中一个检测体系检测人类EGFR的基因突变的19DEL/20Insert突变亚型，一个检测体系检测人类EGFR的基因突变的L858R/T790M突变亚型，一个检测体系检测人类EGFR的基因突变S768I/L861Q/G719C/G719A/G719S的突变亚型。2CN108949927A说明书1/9页一种用于检测人类EGFR基因突变的序列组合物及其试剂盒技术领域[0001]本发明涉及一种人类基因突变的检测方法，尤其涉及一种用于检测人类EGFR基因突变的序列组合物及其试剂盒和方法。背景技术[0002]人类表皮生长因子(epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR)是一种蛋白酪氨酸激酶受体，广泛分布于哺乳动物上皮细胞、成纤维细胞、胶质细胞等细胞表面，具有酪氨酸激酶活性。EGFR是HER/ErbB家族成员之一。EGFR与其配体结合后在细胞表面形成二聚体，通过酪氨酸激酶的活性，激活受体自磷酸化，经过细胞质中的衔接蛋白和酶的级联反应，调节转录因子激活基因的转录，指导细胞迁移、增值、分化和凋亡。当EGFR发生突变时，EGFR自身或配体过表达，从而通过自分泌或旁分泌方式刺激细胞形成失控性增值。此外，EGFR过度活化还可以启动多种蛋白水解和促血管生成因子的表达，从而加速癌细胞的转移。因此，EGFR过表达者通常预后较差。[0003]易瑞沙和特罗凯作为EGFR受体酪氨酸激酶抑制剂，是美国FDA批准用于NSCLC靶向治疗的主要药物。但是临床实验表明易瑞沙和特罗凯仅对10-30％的NSCLC病人