一种生物粘合剂及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110665050A(43)申请公布日2020.01.10(21)申请号201911087311.5(22)申请日2019.11.08(71)申请人江南大学地址214000江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号(72)发明人赖佳惠周娟陈敬华方诗莹杨陈王攀琛曾以妍张羲和(74)专利代理机构哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司23211代理人仇钰莹(51)Int.Cl.A61L24/10(2006.01)A61L24/00(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图4页(54)发明名称一种生物粘合剂及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种生物粘合剂及其制备方法，属于生物粘合剂技术领域。该粘合剂是在氧化条件下由结构蛋白(胶原蛋白、明胶等)和单宁酸进行迈克尔加成反应，经过后续处理，再通过转谷氨酰胺酶(TG)交联制得。本发明提供的生物粘合剂所用的原料均具有良好的生物相容性，替代了传统生物粘合剂中所用的有毒化学组分；同时，原料之间的协同作用可使本产品以凝胶状态更长时间稳定地粘附于伤口处，并使单宁酸本身具有的抗菌和修复皮损伤的效果更持久地作用于伤口处，从而更好地促进伤口修复愈合；该生物粘合剂还能用注射器精准定位，能牢固粘连结合部位，具有重要的生物医药领域的应用价值。CN110665050ACN110665050A权利要求书1/1页1.一种制备可注射型抗菌性生物粘合剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)、在氧化条件下将结构蛋白和单宁酸进行迈克尔加成反应，得到单宁酸修饰的结构蛋白；所述结构蛋白包括明胶或胶原蛋白；2)、将步骤1)制备的单宁酸修饰的结构蛋白在溶液环境中，加入转谷氨酰胺酶，混合均匀后即得该生物粘合剂。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中结构蛋白按质量比为(0.005～0.1)：1溶于溶液环境中，单宁酸和结构蛋白质量比为(0.01～0.1)：1。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)单宁酸和结构蛋白质量比为(0.01～0.1)：1。4.根据权利要求1～3任一所述的方法，其特征在于，步骤1)中迈克尔加成反应的过程具体为：将结构蛋白溶解，调节溶液pH为8.0～9.0；加入单宁酸，持续搅拌并通氧气进行反应，维持溶液pH与上述pH一致，于50～70℃反应1.0～4.0h，反应结束调节溶液pH至7.0～7.8。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，迈克尔加成反应后还进行透析、干燥。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述透析是用分子量截止值≥3500Da的透析管对溶液进行去离子水透析；所述干燥是指冷冻干燥。7.根据权利要求1～6任一所述的方法，其特征在于，将单宁酸修饰的结构蛋白溶于浓度为1～15g/100mL的Tris-HCl缓冲液中加入终浓度为200～1000U/100mL的转谷氨酰胺酶。8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述转谷氨酰胺酶的交联作用温度为20～50℃。9.应用权利要求1～8任一方法制备的生物粘合剂。10.权利要求1～8所述方法或权利要求9所述生物粘合剂在制备活性生理组织间的粘合、生理性管道的填塞补漏、损伤创面的封闭止血或修复的药物，或医疗器械中的应用。2CN110665050A说明书1/6页一种生物粘合剂及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及一种生物粘合剂及其制备方法，属于生物粘合剂技术领域。背景技术[0002]传统的外科手术缝合可以提供很好的抗张强度，以及相对较低的事故率等，但同时存在复杂费时、缝合对伤口造成二次机械损伤、产生细胞排斥免疫、体内残留时间较长时会造成肉芽肿瘤、拆线会带来一定的不适和痛苦等缺点。生物粘合剂是利用生物相容性优异的材料制备而成的无菌、无免疫原性且在一定的时间内能够抑制细菌的生物医学材料。其组分中无溶剂或者溶剂为水，在湿态环境下(即有水、组织液、血液等存在情况下)仍可与机体组织产生一定强度的粘接。生物粘合剂的溶出物等不对机体细胞产生毒性，不影响机体组织的伤口愈合，并且材料自身可降解，满足使用要求后能够被人体组织吸收，并最终被代谢出人体。[0003]目前，临床上常用的生物粘合剂有纤维蛋白粘合剂和贻贝粘蛋白粘合剂，但这些粘合剂仍存在很多缺陷。如纤维蛋白粘合剂存在着粘合强度低、制备时间长、价格昂贵的缺点以及潜在的病毒感染风险；贻贝粘蛋白粘合剂价格昂贵，美国售价达到115美元/mg。[0004]因此，研究人员一直在研究这两类生物粘合剂的替代品。近年来明胶基粘合剂成为一类重要的生物粘合剂，其粘合强度高，成本低，生物相容性好。如专利CN105879109A公开了一种价格低廉、粘合性强、适用于外科手术的生物粘合剂，该粘合剂由明胶水溶液和戊二醛水溶液混合生成。虽然该专利公开的粘合剂可以满足粘