制备芯片的方法、芯片以及固定生物分子的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113913945A(43)申请公布日2022.01.11(21)申请号202111178485.X(22)申请日2018.10.12(62)分案原申请数据201811191589.22018.10.12(71)申请人深圳市真迈生物科技有限公司地址518000广东省深圳市罗湖区清水河街道清水河一路116号深业进元大厦2座5楼、6楼(72)发明人高锦鸿赵智赵陆洋王琦(51)Int.Cl.C40B50/06(2006.01)C40B40/08(2006.01)C40B40/10(2006.01)权利要求书2页说明书9页附图2页(54)发明名称制备芯片的方法、芯片以及固定生物分子的方法(57)摘要本申请公开了一种制备芯片的方法、一种芯片以及一种固定核酸分子和/或蛋白分子的方法。所称的芯片包括基底以及通道，基底具有与通道连接的表面，制备芯片的方法包括(a)往通道通入第一溶液，第一溶液包含生物分子，以使生物分子连接到表面，生物分子选自核酸分子和/或蛋白分子；以及(b)往通道通入第二溶液替换(a)后的通道中的第一溶液，第二溶液包含表面活性剂，以对(a)后的表面进行弱钝化处理，包括使表面接触第二溶液一定时长，以促进生物分子与表面的连接。CN113913945ACN113913945A权利要求书1/2页1.一种制备芯片的方法，其特征在于，所述芯片包括基底以及一条或多条通道，所述基底具有与所述通道连接的表面，所述方法包括：(a)往所述通道通入第一溶液，所述第一溶液包含生物分子，以使所述生物分子连接到所述表面，所述生物分子为核酸分子或蛋白分子；以及(b)往所述通道通入第二溶液以替换(a)的第一溶液，所述第二溶液包含表面活性剂，以对(a)后的表面进行弱钝化处理，包括使所述表面接触所述第二溶液一定时长，以促进所述生物分子与所述表面的连接。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述表面活性剂为阳离子表面活性剂；任选地，所述第二溶液中的表面活性剂选自十六烷基三甲基溴化铵、双十八烷基溴化铵、十六烷基三甲基氯化铵、十二烷基三甲基溴化铵和四辛基溴化铵中的至少一种；任选地，所述第二溶液中的表面活性剂的浓度为1‑25mmol/L；任选地，所述第二溶液中的表面活性剂的浓度为10mmol/L；任选地，所述一定时长为2h‑5h；任选地，所述弱钝化处理于35℃‑40℃中进行。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生物分子包含核酸分子，并且所述核酸分子带有氨基修饰；任选地，所述表面为化学修饰后的表面，所述化学修饰后的表面具有环氧基团、醛基、羧基、N‑羟基琥珀酰亚胺和二氨基苯酰替苯胺中的至少一种活性基团；任选地，所述核酸分子的3'末端和/或5'末端具有所述氨基修饰；任选地，所述核酸分子的3'末端或5'末端带有荧光基团；任选地，所述荧光基团为Cy3。4.根据权利要求1‑3任一项所述的方法，其特征在于，所述第一溶液包含表面活性剂；任选地，所述第一溶液包含的表面活性剂与第二溶液包含的表面活性剂为相同种类表面活性剂；任选地，所述第一溶液包含0.01‑0.10nmol/L所述表面活性剂；任选地，所述第一溶液包含0.05nmol/L所述表面活性剂。5.根据权利要求1‑4任一项所述的方法，其特征在于，还包括(c)往所述通道通入第三溶液以替换(b)的第二溶液，所述第三溶液不包含所述表面活性剂，以对(b)后的表面进行钝化处理；任选地，还包括(d)依次往所述通道通入第四溶液、第五溶液和第六溶液以对(c)后的表面进行洗涤，所述第四溶液、第五溶液和第六溶液均不含表面活性剂。6.根据权利要求1‑5任一项所述的方法制备得的芯片。7.权利要求6所述的芯片在检测核酸和/或蛋白中的应用。8.一种将生物分子固定至指定表面的方法，其特征在于，包括在所述生物分子固定至所述表面之后对所述表面进行弱钝化处理，所述生物分子为核酸分子或蛋白分子，所述弱钝化处理包括使所述表面与第二溶液接触一定时长，以促进所述生物分子与所述表面的结合，所述第二溶液包含表面活性剂。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述表面活性剂为阳离子表面活性剂；任选地，所述表面活性剂选自十六烷基三甲基溴化铵、双十八烷基溴化铵、十六烷基三2CN113913945A权利要求书2/2页甲基氯化铵、十二烷基三甲基溴化铵和四辛基溴化铵中的至少一种；任选地，所述第二溶液中的表面活性剂的浓度为1‑25mmol/L，任选地，10mmol/L；任选地，所述弱钝化处理的条件为35℃‑40℃2h‑5h。10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于，利用第一溶液进行所述固定，所述第一溶液为包含所述生物分子的第二溶液。3CN113913945A说明书1/9页制备芯片的方法、芯片以及固定