一种去氧胆酸注射液的含量测定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114137107A(43)申请公布日2022.03.04(21)申请号202111367415.9(22)申请日2021.11.18(71)申请人南京迈诺威医药科技有限公司地址210018江苏省南京市江北新区新锦湖路3-1号中丹生态生命科学产业园一期A栋637室(72)发明人刘智慧周春燕卢月月(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/88(2006.01)权利要求书2页说明书21页附图2页(54)发明名称一种去氧胆酸注射液的含量测定方法(57)摘要本发明提供了一种去氧胆酸注射液的药物含量测定方法，该方法操作简单、便捷、快速、准确，其包括以下步骤：a)将去氧胆酸标准品溶于溶剂中，配制成8µg/ml~12µg/ml梯度浓度分布的去氧胆酸标准品溶液，各标准品溶液浓度分别为Xi；b)在常压下，采用高效液相色谱分析法测定各个标准品溶液的峰面积Yi；c)应用最小二乘法进行线性回归，建立峰面积、标准品溶液浓度两者之间的数学关系，Y＝kX+b；d)在常压下，采用高效液相色谱分析法测定待测去氧胆酸供试品溶液的峰面积A；e)利用步骤c)中的数学关系，按照以下公式、计算待测去氧胆酸注射液的药物浓度和药物含量。CN114137107ACN114137107A权利要求书1/2页1.一种去氧胆酸注射液的药物含量测定方法，其包括以下步骤：a)将去氧胆酸标准品溶于溶剂中，配制成8μg/ml～12μg/ml梯度浓度分布的去氧胆酸标准品溶液，各标准品溶液浓度分别为Xi；b)在常压下，采用高效液相色谱分析法测定各个标准品溶液的峰面积Yi；c)应用最小二乘法进行线性回归，建立峰面积、标准品溶液浓度两者之间的数学关系，Y＝kX+b；d)在常压下，采用高效液相色谱分析法测定待测去氧胆酸供试品溶液的峰面积A；e)利用步骤c)中的数学关系，按照以下公式①、②计算待测去氧胆酸注射液的药物浓度C药和药物含量；①去氧胆酸注射液的药物浓度计算公式为：②去氧胆酸注射液的药物含量计算公式为：上式中：A为供试品溶液峰面积，k为线性方程斜率，b为线性方程截距，N为供试品溶液的稀释倍数，C为制剂标示量，10mg/ml。2.根据权利要求1所述的含量测定方法，其中，步骤a)中，所述溶剂为80％的甲醇溶液；所述的8μg/ml～12μg/ml梯度浓度选自8μg/ml、10μg/ml、12μg/ml梯度浓度或8μg/ml、9μg/ml、10μg/ml、11μg/ml、12μg/ml梯度浓度中的一种。3.根据权利要求1所述的含量测定方法，其中，所述高效液相色谱分析法的条件为：高效液相色谱仪、检测器为电喷雾检测器；色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为0.1％甲酸水溶液，流动相B为0.1％甲酸乙腈溶液，洗脱条件为A相：B相＝35：65等度洗脱；柱温35℃，流速1.0ml/min，进样量为25μl。4.根据权利要求3所述的含量测定方法，其中，所述色谱柱为AgilentPursuitC18色谱柱。5.根据权利要求3所述的含量测定方法，其中，所述色谱柱为AgilentPursuitC183μm4.6×150mm色谱柱。6.一种去氧胆酸注射液的药物含量测定方法，其包括以下步骤：a)将去氧胆酸标准品溶于溶剂中，配制成8μg/ml～12μg/ml梯度浓度分布的去氧胆酸注射液的标准品溶液，各标准品溶液浓度分别为Xi；b)在常压下，采用高效液相色谱分析法测定各个标准品溶液的峰面积Yi；c)应用最小二乘法进行线性回归，建立峰面积、标准品溶液浓度两者之间的数学关系，Y＝kX+b；d)在常压下，配制10μg/ml浓度的去氧胆酸标准品溶液作为质控溶液，采用高效液相色谱分析法测定质控溶液的峰面积，代入公式③计算质控回收率，质控回收率应在97.0％～103.0％范围内；e)在常压下，采用高效液相色谱分析法测定待测去氧胆酸供试品溶液的峰面积A；2CN114137107A权利要求书2/2页f)利用步骤c)中的数学关系，按照以下公式①、②计算待测去氧胆酸注射液的药物浓度和药物含量；①去氧胆酸注射液的药物浓度计算公式为：②去氧胆酸注射液的药物含量计算公式为：上式①、②中：A为供试品溶液峰面积，k为线性方程斜率，b为线性方程截距，N为供试品溶液的稀释倍数，C为制剂标示量，10mg/ml；③标准品溶液4质控回收率：上式③中：AS为标准品溶液4峰面积，CS为标准品溶液4浓度，mg/ml，b为线性方程截距，k为线性方程斜率。7.根据权利要求6所述的测定方法，其中，所述溶剂为80％的甲醇溶液；所述的8μg/ml～12μg/ml梯度浓度选自8μg/ml、10μg/ml、12μg/ml梯度浓度或8μg