安徽省地方标准饲料中盐酸克伦特罗的测定——胶体金免疫层析法.pdf

ICS备案号：DB34安徽省地方标准DB34/T818—2008饲料中盐酸克伦特罗的测定——胶体金免疫层析法2008-08-01发布2008-08-01实施安徽省质量技术监督局发布DB34/T818—2008前言本标准由安徽省畜牧兽医局提出。本标准由安徽省质量技术监督局批准。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所、安徽省畜产品质量安全检测中心。本标准起草人：许世富、蔡东东、汤春莲、明文庆。本标准于2008年8月1日首次发布。IDB34/T818—2008饲料中盐酸克伦特罗的测定——胶体金免疫层析法1范围本标准规定了用胶体金免疫层析法检测饲料中的盐酸克伦特罗。本标准适用于饲料中盐酸克伦特罗的快速检测。本标准检测限为10µg/kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准然而鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理本试验为竞争抑制法。将氯金酸用还原法制成一定直径的金溶胶颗粒标记抗体。硝酸纤维素膜为载体利用了微孔膜的毛细管作用滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移。在移动的过程中会发生相应的抗原抗体反应并通过免疫金的颜色而显示出来。样本中的盐酸克伦特罗在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合抑制了抗体和硝酸纤维素（NC）膜检测线上盐酸克伦特罗－BSA偶联物的结合使检测线不显颜色结果为阳牲；反之检测线显红色结果为阴性。4试剂和材料除非另有说明本法所用试剂均为分析纯水为去离子水符合GB/T6682二级水的规定。4.1胶体金免疫层析快速检测装置组成4.1.1盐酸克伦特罗全抗原的偶联率为1：10～1：20（BSA：CL）。4.1.2抗盐酸克伦特罗抗体、多抗或单杭。多抗可以由兔或羊血清获得效价应大于5000（间接ELISA法）或有效抗体含量应大于0.05mg/mL；特异性应大于5000（间接抑制ELISA法）。单抗由鼠腹水获得效价应大于15000（间接ELISA法）或有效扰体含量应大于0.5mg/mL；特异性应大于5000（间接抑制ELISA法）。抗体相对亲和力为3.56×109（结合率下降50％时相对应的抗体浓度的例数）。4.1.3样品垫：玻璃纤维或纸质薄片。4.1.4金释放垫：玻璃纤维片免疫金释放时间小于5min释放效率大于80％。4.1.5NC膜：孔径为0.45μm4cm毛细管时间不小于140s。4.1.6吸水纸。4.1.7底板。4.1.8塑料盒。4.2塑料吸管。4.3离心机。4.4