薛惠_天麻多糖的提取分离纯化及抗氧化糖化研究.docx

天麻多糖的提取分离纯化及抗氧化糖化研究50摘要天麻（G.elata兰科）是一种多年生的寄生植物具有极高的营养和药用价植。多糖是天麻的的一个主要活性成分目前天麻多糖的研究有限从而限制了天麻资源的深度开发和应用。本文以天麻为原料研究传统水提醇沉法和超声辅助水提醇沉法提取天麻多糖的动力学模型通过离子交换柱层析法得到3种天麻多糖组分分析比较了其理化性质、分子特性和生物活性进一步对天麻活性多糖进行凝胶柱层析法纯化解析其化学结构为天麻多糖的深加工提供理论依据。研究所取得的结果如下：以Fick扩散第二定律为基础分别建立了传统水提醇沉法和超声辅助水提醇沉法提取天麻多糖的动力学模型所建立的模型均能够很好的体现天麻颗粒半径R、提取时间t、提取温度T、超声功率P与提取液中多糖浓度C之间的关系并对动力学中提取速率k、有效扩散系数、活化能Ea、半衰期t1/2等参数进行了求解。利用DEAE-52纤维素阴离子交换柱层析对天麻多糖进行分离分级获得PS-D1（蒸馏水）、PS-D2（0.1MNaCl）和PS-D3（0.2MNaCl）三种多糖组分。基本化学组成表明三种多糖组分主要由果糖和葡萄糖组成且它们的纯度均在85%以上PS-D2和PS-D3含有一定的糖醛酸（≥10.0%）。多角度光散射试验表明三种多糖组分具有不同的分子量（Mw为62、159和385kDa）及其分布。刚果红试验表明三种多糖组分都不具有三螺旋结构在水溶液中均表现为无规线团或聚集体链构象。扫描电镜结果揭示了天麻多糖的基本外貌形态PS-D1和PS-D2呈纤维树枝状PS-D3形貌较光滑表现为片状和碎屑状堆积。体外抗氧化研究发现天麻多糖PS-D1、PS-D2和PS-D3均具有较好的等价抗氧化能力（41.23、44.97和53.83μmolTrolox/g样品）、三价铁离子的还原能力（45.01、45.80和53.87μmolFe2+/g）以及清除∙OH（IC50值为1.56、1.03和0.99mg/mL）、O2-∙（IC50值为2.45、1.94和1.46mg/mL）和DPPH（IC50值3.14、2.85和2.31mg/mL）自由基的能力且呈剂量依赖关系体外抗糖基化表明PS-D2和PS-D3都有较好的抑制糖基化末端终产物（AGEs）的能力（45.1和47.5%）。进一步对三个天麻多糖组分中的高得率高活性组分PS-D2进行SephacraylS-400凝胶柱的分离纯化得到主要多糖组分PS-D2S。研究发现PS-D2S的多糖含量为98.1%糖醛酸含量为1.3%重均分子量（Mw）为147.2kDa由葡萄糖和半乳糖组成且它们之间的分子摩尔比为82:1红外光谱分析多糖为α型的糖苷键连接结合高碘酸氧化、Smith降解和核磁共振等结果推测PS-D2S主链由→4)-α-D-Glcp(1→和→2)-α-D-Galp(1→糖残基构成0-6分支点在→2)-α-D-Galp(1→糖残基上分支由1-α-D-GlcUp构成。关键词：天麻多糖；提取；动力学；理化性质；抗氧化活性；化学结构。AbstractG.elata(Orchidaceae)isaperennialparasiticplantwithextremelyhighnutritionandmedicinalvalue.PolysaccharideisamajoractiveingredientofGastrodiaelatabutthecurrentdevelopmentandutilizationofGastrodiaelataismainlyfocusedontheextractionofstarchandflavonoids.TheresearchonGastrodiapolysaccharideislimitedwhichlimitsthefurtherdevelopmentandapplicationofGastrodiaelataresources.InthispaperGastrodiaelatawasusedasarawmaterialtostudythekineticmodeloftraditionalwaterextractionandalcoholprecipitationandultrasonic-assistedwaterextractionandalcoholprecipitationtoextractGastrodiapolysaccharides.ThreetypesofGastrodiapolysaccharidecompone