鸡肉中氟苯尼考ELISA检测方法的建立及应用.pdf

中国农业科学200942(5):1813-1819ScientiaAgriculturaSinicadoi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.05.039鸡肉中氟苯尼考ELISA检测方法的建立及应用孙法良刁有祥孙宁马艳芳纪巍（山东农业大学动物科技学院山东泰安271018）摘要：【目的】制备抗氟苯尼考（FFC）的高亲和力特异性抗体建立检测氟苯尼考的间接竞争ELISA新方法。【方法】氟苯尼考分别与牛血清白蛋白（BSA）和人血清白蛋白（HSA）经混合酸酐法偶联得到免疫抗原和包被抗原其偶联比分别为14.4和14.7。用免疫原FFC-HS-BSA免疫新西兰大白兔获得了效价较高的特异性抗体。建立并优化了间接竞争ELISA检测方法。【结果】抗血清效价为1﹕102400。最佳包被抗原浓度为0.5µg·ml-1最佳抗体工作浓度为1﹕6400酶标二抗的工作浓度为1﹕20000。回归方程Y=-0.1516X+0.788（R2=0.9859）检测范围为0.18～500ng·ml-1检出限为0.18ng·ml-1批内和批间平均变异系数分别为4.86%和7.77%。交叉反应试验中抗血清与FFC结构相似的氯霉素和甲砜霉素交叉反应率分别为0.094%和0.098%与其它药物交叉反应率均小于0.01%表明该方法具有很强的特异性。FFC以浓度0.18～500ng·g-1在鸡肉中添加回收率为84.14%～106.1%变异系数为2.1%～5.6%。【结论】成功获得了高效价、高特异性的抗FFC抗体建立了鸡肉中氟苯尼考残留检测的ELISA方法。结果表明所建立的检测方法具有灵敏、准确、简便、快速的特点。关键词：氟苯尼考；残留检测；间接竞争ELISAEstablishmentandApplicationofDetectingtheResiduesofFlorfenicolinChickenMusclebyIndirectCompetitiveEnzyme-LinkedImmunosorbentAssaySUNFa-liangDIAOYou-xiangSUNNingMAYan-fangJIWei(CollegeofAnimalScienceandTechnologyShandongAgriculturalUniversityTaian271018Shandong)Abstract:【Objective】Thepurposeofthestudyistoobtainspecialantibodyanddevelopcompetitiveindirectenzyme-linkedimmunosorbentassay(ciELISA)forflorfenicol【Me