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微生物学洪龙62756091生物技术楼202hongl@pku.edu.cn参考书讲授内容第二章微生物的纯培养与显微技术微生物学的基础实验技术一、显微技术我家里的几位女眷想要看醋里的线虫可是看了以后厌恶地发誓说再也不用醋了。要是我告诉她们在口腔里牙垢上生活的动物比全国的人口还多她们将会怎样反应呢?Leeuwenhoek科学问题:生命的最小极限?必需基因的类别已知最小的独立生活的生命体最大的细菌决定显微镜观察效果的因素显微镜的种类分辨率是决定观察效果最重要的指标光学显微镜原理光学显微镜原理观察细菌应使用油镜光学显微镜物镜的特性提高数值孔径的途径暗视野显微镜(dark-fieldmicroscopy)暗视野显微镜(dark-fieldmicroscopy)相差显微镜(phase-contrastmicroscopy)相差显微镜荧光显微镜(Fluorescentmicroscopy)荧光显微镜各种光学显微镜的使用范围电子显微镜透射电镜扫描电镜扫描电镜扫描隧道显微镜(STM)原子力显微镜光学显微镜观察样品的制备和染色压滴法(水封片法)示意图悬滴法示意图埋片法示意图染色观察固定的目的固定的方法细菌染色法二、微生物的纯培养技术微生物的基本特点柯赫法则不适合专性寄生的病原菌微生物的纯种分离技术微生物培养的常用器具及其灭菌琼脂和Petridish灭菌的方法超净台及接种操作培养基培养基的种类及用途菌落与菌苔菌落的一些特征使用固体培养基进行纯种分离(1)稀释分离法(2)划线分离法各种划线方法单细胞(孢子)分离微生物的培养条件厌氧微生物厌氧条件的获得厌氧微生物的培养