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第二节微生物工程常用微生物及培养基一微生物工程常用微生物2.酵母菌工业上用的酵母菌有:啤酒酵母、假丝酵母、类酵母等。3.霉菌4.放线菌5.担子菌6.藻类二培养基选择和配制的原则1、培养基的类型和用途根据使用目的可分为:增殖培养基(加富培养基):针对某种微生物的生长特点加入营养物质。鉴别培养基:是培养基中加有能与某一菌的无色代谢物发生显色反应的指示剂从而用肉眼区别于该菌与其他菌。选择培养基:是根据某种生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。根据生产工艺的要求可分为孢子培养基:是供制备孢子用的培养基种子培养基:是满足菌种生长的培养基。发酵培养基:是满足大生产中大量菌体生长和繁殖以及代谢产物积累的营养基质。2、培养基的选择(3)从生产实践和科学试验的不同要求选择(4)从经济效益方面考虑选择生产原料3、培养基的配制原则4、培养基成分配比的选择第三节工业发酵培养基一、工业上常用的碳源大麦经发芽制成麦芽除了淀粉外麦芽还含有许多糖分。其碳水化合物组成见下表。碳水化合物含量(总干重)%淀粉58一60蔗糖3一5还原糖3一4其他糖2半纤维素6—8纤维素5蔗糖一般来自甘蔗或甜菜在发酵培养基中常用的甜菜或甘蔗糖蜜是在糖精制作过程中留下的残液。用于生产疫苗的培养基通常是用牛血清蛋白、牛肉汁等蛋白质作为碳源二、工业上常用的氮源三、无机盐1·磷酸盐磷是某些蛋白质和核酸的组成成分。磷酸盐在培养基中还具有缓冲作用。常用K3PO4·3H2O、K3PO4和Na2HPO4·12H2O等另外玉米浆、糖蜜、淀粉水解糖等原料中还有少量的磷。磷含量对谷氨酸发酵影响很大。磷浓度过高时菌体转向合成缬氨酸;但磷含量过低菌体生长不好。3.钾盐钾不参与细胞结构物质的组成。它是许多酶的激活剂。谷氨酸发酵产物生成所需要的钾盐比菌体生长需要量高。菌体生长需钾量约为0·1克/L谷氨酸生成需钾量为0·2一1·0克/L钾对谷氨酸发酵有影响钾盐少长菌体钾盐足够产谷氨酸。4.微量元素还有许多元素微生物需要量十分微小但又是不可缺少的称为微量元素。例如锰是某些酶的激活剂羧化反应必须有锰参与铁是细胞色素氧化酶、过氧化氢酶的成分又是若干酶的激活剂。四生长因子1·生物素生物素的作用主要影响谷氨酸产生菌细胞膜的通透性同时也影响菌体的代谢途径。谷氨酸发酵最适的生物素浓度随菌种、碳源种类和浓度以及供氧条件不同而异一般为5μg/L左右。2·维生素Bl(硫胺素)维生素Bl对某些谷氨酸菌种的发酵有促进作用。3·提供生长因子的农副产品原料(1)玉米浆:一般用量为0·4%一0.8%。(2)麸皮水解液可以代替玉米浆但蛋白质、氨基酸等营养成分比玉米浆少。用量一般为1%左右(3)糖蜜甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜均可代替玉米浆。但氨基酸等有机氮含量较低。甘蔗糖蜜用量为0.1%一0·4%。(4)酵母可用酵母膏、酵母浸出液或直接用酵母粉。五、前体物质和促进剂第四节发酵工艺控制一、温度对发酵的影响及共调节控制温度的影响是多方面的可以影响各种发酵条件最终影响微生物的生长和产物形成(一)、温度对发酵的影响温度对发酵的影响主要表现在对细胞生长、产物形成、发酵液的物理性质和生物合成方向等方面。1、温度对微生物细胞生长的影响最适温度:2、温度影响发酵液的物理性质温度对氧在发酵液中的溶解度就有很大的影响随着温度的升高气体在溶液中的溶解度减小氧的传递速率也会改变。另外温度还影响基质的分解速率例如菌体对硫酸盐的吸收在25℃时最小。3、、温度影响生物合成的方向例如在四环类抗生素发酵中金色链丝菌能同时产生四环素和金霉素在低于30C时它合成金霉素的能力较强。随着温度的提高合成四环素的比例提高。当温度超过35C时金霉素的合成几乎停止只产生四环素。(二)、影晌发酵温度的因素发酵热:发酵过程中释放出来的净热量。(三)、最适温度的选择与发酵温度控制1、选择最适温度主要应考虑两方面:A、微生物生长的最适温度B、产物合成的最适温度乳酸链球菌的最适生长温度是34C而产酸的最适温度不超过30C。因此需要在不同的发酵阶段选择不同的最适温度。2、选择最适温度要考虑培养条件