【精选】实验巨噬细胞酸性磷酸酶显.ppt

实验八、巨噬细胞酸性磷酸酶显示组织化学（histochemistry）和细胞化学（cytochemistry）1.糖类显示法2.酶类显示3．脂类显示4．核酸显示法酸性磷酸酶显示实验原理实验材料：实验试剂及用品3、酸性磷酸酶作用液配方：蒸馏水90ml0．2mol／L醋酸缓冲液(pH4．6)12ml5％硝酸铅2ml3.2％β—甘油磷酸钠4ml配法：先将蒸馏水和醋酸缓冲液混合随后分成大致相等的两份一份中加硝酸铅溶液另一份加甘油磷酸钠溶液然后再将两者缓缓混合边混边搅匀。若pH不到5．0可加少量醋酸的调整。注意：配好后的作用液应透明无絮状悬浮物和沉淀；最好在临用前配制不能贮存。附：0．2mol／L醋酸缓冲液（pH4．6）配制方法0.2mol/l醋酸（ml）25.50.2mol/l醋酸钠（ml）24.54、1％硫化铵溶液硫化胺1ml蒸馏水9ml5、姬姆萨染液（1：30）姬姆萨原液3滴磷酸盐缓冲液（pH6．8）5ml实验方法6、加足量酸性磷酸酶作用液覆盖样品放37℃水浴箱中反应30min。7、自来水漂洗片刻。9、在通风橱中加硫化铵反应10min。10、自来水冲洗甩干。11、直接加PBS封片（或用1∶30的Giemsa染液染色15min再封片）。12、镜检作业