实验八、巨噬细胞酸性磷酸酶显示.ppt

实验八、巨噬细胞酸性磷酸酶显示组织化学（histochemistry）和细胞化学（cytochemistry）1.糖类显示法2.酶类显示3．脂类显示4．核酸显示法酸性磷酸酶显示实验原理实验材料：实验试剂及用品3、酸性磷酸酶作用液配方：
蒸馏水90ml
0．2mol／L醋酸缓冲液(pH4．6)12ml
5％硝酸铅2ml3.2％β—甘油磷酸钠4ml
配法：先将蒸馏水和醋酸缓冲液混合，随后分成大致相等的两份，一份中加硝酸铅溶液，另一份加甘油磷酸钠溶液，然后再将两者缓缓混合，边混边搅匀。若pH不到5．0，可加少量醋酸的调整。注意：配好后的作用液应透明无絮状悬浮物和沉淀；最好在临用前配制，不能贮存。
附：0．2mol／L醋酸缓冲液（pH4．6）配制方法
0.2mol/l醋酸（ml）25.5
0.2mol/l醋酸钠（ml）24.5
4、1％硫化铵溶液硫化胺1ml蒸馏水9ml
5、姬姆萨染液（1：30）姬姆萨原液3滴
磷酸盐缓冲液（pH6．8）5ml

实验方法6、加足量酸性磷酸酶作用液覆盖样品，放37℃水浴箱中反应30min。
7、自来水漂洗片刻。
9、在通风橱中加硫化铵反应10min。
10、自来水冲洗，甩干。
11、直接加PBS封片（或用1∶30的Giemsa染液染色15min再封片）。12、镜检作业