高纯度甜菊醇糖苷.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107105734A(43)申请公布日2017.08.29(21)申请号201580061214.2(87)PCT国际申请的公布数据WO2016/(22)申请日2015.08.21043926EN2016.03.24(30)优先权数据(71)申请人谱赛科有限责任公司62/052,5442014.09.19US地址马来西亚吉隆坡62/061,3592014.10.08US申请人可口可乐公司62/062,2882014.10.10US(72)发明人A·马科斯雅恩I·普兰卡什62/064,6302014.10.16USC·加林A·巴蝶R·特哈乐62/082,4462014.11.20USC·邦德斯D·奥瑞儿62/097,3872014.12.29US(74)专利代理机构中国国际贸易促进委员会专62/118,1322015.02.19US利商标事务所1103862/185,9642015.06.29US代理人李瑛PCT/US2015/0459062015.08.19US(51)Int.Cl.(85)PCT国际申请进入国家阶段日A23L27/30(2016.01)2017.05.11C07H1/06(2006.01)(86)PCT国际申请的申请数据权利要求书3页说明书105页PCT/US2015/0463542015.08.21序列表23页附图90页(54)发明名称高纯度甜菊醇糖苷(57)摘要描述了制备高度纯化的甜菊醇糖苷，特别是莱鲍迪苷A、D和M的方法。所述方法包括利用重组微生物将各种起始组合物转化成靶甜菊醇糖苷。此外，公开了新的甜菊醇糖苷rebD2、rebM2和rebI，及其制备方法。高度纯化的莱鲍迪苷可以用作可食和可咀嚼组合物中的无热量甜味剂，所述组合物如任何饮料、糖食、烘焙产品、饼干和口香糖。CN107105734ACN107105734A权利要求书1/3页1.用于生产高度纯化的靶甜菊醇糖苷组合物的方法，包括下列步骤：a.提供包含至少一种有机化合物的起始组合物；b.提供含有甜菊醇生物合成酶、UDP-糖基转移酶并且可选地含有UDP-葡萄糖再循环酶的重组微生物；c.将所述重组微生物与包含起始组合物的培养基接触，以产生包含靶甜菊醇糖苷的组合物；和d.从所述培养基中分离所述靶甜菊醇糖苷，以提供高度纯化的靶甜菊醇糖苷组合物。2.权利要求1的方法，其中所述起始组合物选自多元醇、碳水化合物及其组合。3.权利要求1的方法，其中所述微生物选自大肠杆菌(E.coli)、酵母属(Saccharomycessp.)、曲霉属(Aspergillussp.)、毕赤酵母属(Pichiasp.)、芽孢杆菌属(Bacillussp.)和耶氏酵母属(Yarrowiasp.)。4.权利要求1的方法，其中靶甜菊醇糖苷选自蛇菊苷、rebA、rebD、rebD2、rebM、rebM2、rebI及其组合。5.权利要求1的方法，其中使用结晶、通过膜分离、离心、提取、色谱分离或这些方法的组合，从培养基中分离靶甜菊醇糖苷。6.权利要求1的方法，其中高度纯化的靶甜菊醇糖苷组合物包含基于干基含量高于约95％重量的靶甜菊醇糖苷。7.权利要求6的方法，其中靶甜菊醇糖苷选自蛇菊苷、rebA、rebE、rebD、rebD2、rebM、rebM2和rebI。8.权利要求6的方法，其中靶甜菊醇糖苷是rebI。9.根据权利要求1的方法制备的高度纯化的靶甜菊醇糖苷组合物，其包含基于干基含量高于约95％重量的靶甜菊醇糖苷内容物。10.权利要求9的高度纯化的靶甜菊醇糖苷组合物，其中靶甜菊醇糖苷选自rebD、rebM和rebI。11.根据权利要求1的方法制备的高度纯化的靶甜菊醇糖苷组合物，其中靶甜菊醇糖苷是多晶形的。12.权利要求11的高度纯化的靶甜菊醇糖苷组合物，其中靶甜菊醇糖苷是rebD或rebM或rebI。13.包含权利要求1的高度纯化的靶甜菊醇糖苷组合物的消费品，其中所述产品选自食品、饮料、药物组合物、烟草制品、营养保健品组合物、口腔卫生组合物和化妆品组合物。14.权利要求13的消费品，其中靶甜菊醇糖苷是rebD。15.权利要求13的消费品，其中靶甜菊醇糖苷是rebM。16.权利要求13的消费品，其中靶甜菊醇糖苷是rebI。17.具有以下结构的rebI：2CN107105734A权利要求书2/3页18.包含rebI的消费品。19.权利要求18的消费品，其中所述组合物选自食品、饮料、药物组合物、烟草制品、营养保健品组合物、口腔卫生组合物和化妆品组合物。20.权利要求18的消费品，包括含有rebI的饮料。21.用于制备rebI的方法，包括：a.将包含rebA的起始组合物与能够将rebA转化成rebI的酶、UDP-葡萄糖且可选