高纯度甜菊醇糖苷.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112367854A(43)申请公布日2021.02.12(21)申请号201980041677.0克里斯蒂娜·查汗(22)申请日2019.06.07海尔·尼扎姆本纳威周绍银(30)优先权数据(74)专利代理机构北京同立钧成知识产权代理62/682,4612018.06.08US有限公司11205代理人马爽臧建明(85)PCT国际申请进入国家阶段日2020.12.21(51)Int.Cl.A23L27/30(2016.01)(86)PCT国际申请的申请数据A23L2/60(2006.01)PCT/US2019/0361252019.06.07A23G4/10(2006.01)(87)PCT国际申请的公布数据A23C9/13(2006.01)WO2019/237044EN2019.12.12A24B15/40(2006.01)C07H15/256(2006.01)(71)申请人谱赛科美国股份有限公司C12P19/56(2006.01)地址美国伊利诺斯(72)发明人阿韦季克·马尔科西亚沙拉瓦南·A·L·拉曼达赫权利要求书5页说明书66页穆罕默德·阿夫扎尔本哈西姆序列表8页附图37页(54)发明名称剂。高纯度甜菊醇糖苷(57)摘要本发明描述了制备高度纯化的甜菊醇糖苷、具体地甜菊单糖苷、甜菊单糖苷A、甜菊双糖苷A、甜菊双糖苷B、甜菊双糖苷C、甜菊双糖苷D、甜菊双糖苷E、甜茶苷、杜尔可苷A、杜尔可苷C、杜尔可苷D、甜菊苷A、甜菊苷B、甜菊苷C、甜菊苷G、甜菊苷H、莱苞迪苷B2、莱苞迪苷A4、莱苞迪苷C、莱苞迪苷C3、莱苞迪苷C4、莱苞迪苷C5、莱苞迪苷C6、莱苞迪苷E3、莱苞迪苷E4、莱苞迪苷E5、莱苞迪苷E6、莱苞迪苷E7、莱苞迪苷D5、莱苞迪苷D6、莱苞迪苷D7、莱苞迪苷D8、莱苞迪苷H2、莱苞迪苷H3、莱苞迪苷H4、莱苞迪苷H5、莱苞迪苷H6、莱苞迪苷K、莱苞迪苷N2、莱苞迪苷N3、莱苞迪苷N4、莱苞迪苷N5、莱苞迪苷M3和/或莱苞迪苷O4的方法。所述方法包括利用酶制剂和重组微生物将各种起始组合物转化为目标甜菊醇糖苷。所述高度纯化的甜菊醇糖苷可用作可食用和可咀嚼组合物诸如任何饮料、糖食、烘焙产品、曲奇饼和口香糖中的CN112367854A无热量甜味剂、风味增强剂、甜味增强剂和抑泡CN112367854A权利要求书1/5页1.具有下式的莱苞迪苷N2：2.具有下式的莱苞迪苷O4：3.一种用于产生根据权利要求1所述的高度纯化的莱苞迪苷N2的方法，所述方法包括以下步骤：a.提供包含具有至少一个碳原子的有机化合物的起始组合物；b.提供含有至少一种酶的酶制剂或微生物，所述至少一种酶选自甜菊醇生物合成酶、UDP-葡糖基转移酶、UDP-糖基转移酶以及任选UDP-葡萄糖和UDP-鼠李糖再循环酶；c.使所述酶制剂或微生物与含有所述起始组合物的介质接触以产生包含莱苞迪苷N2的介质。4.一种用于产生根据权利要求2所述的高度纯化的莱苞迪苷O4的方法，所述方法包括以下步骤：2CN112367854A权利要求书2/5页a.提供包含具有至少一个碳原子的有机化合物的起始组合物；b.提供含有至少一种酶的酶制剂或微生物，所述至少一种酶选自甜菊醇生物合成酶、UDP-葡糖基转移酶、UDP-糖基转移酶以及任选UDP-葡萄糖和UDP-鼠李糖再循环酶；c.使所述酶制剂或微生物与含有所述起始组合物的介质接触以产生包含莱苞迪苷O4的介质。5.一种用于产生根据权利要求1所述的高度纯化的莱苞迪苷N2的方法，所述方法包括以下步骤：a.提供包含具有至少一个碳原子的有机化合物的起始组合物；b.提供包含至少一种酶的生物催化剂，所述至少一种酶选自甜菊醇生物合成酶、UDP-葡糖基转移酶、UDP-糖基转移酶以及任选UDP-葡萄糖和UDP-鼠李糖再循环酶；c.使所述生物催化剂与含有所述起始组合物的介质接触以产生包含莱苞迪苷N2的介质。6.一种用于产生根据权利要求2所述的高度纯化的莱苞迪苷O4的方法，所述方法包括以下步骤：a.提供包含具有至少一个碳原子的有机化合物的起始组合物；b.提供包含至少一种酶的生物催化剂，所述至少一种酶选自甜菊醇生物合成酶、UDP-葡糖基转移酶、UDP-糖基转移酶以及任选UDP-葡萄糖和UDP-鼠李糖再循环酶；c.使所述生物催化剂与含有所述起始组合物的介质接触以产生包含莱苞迪苷O4的介质。7.根据权利要求3或5所述的方法，所述方法还包括以下步骤：d.将所述莱苞迪苷N2从所述介质分离以提供高度纯化的莱苞迪苷N2组合物。8.根据权利要求4或6所述的方法，所述方法还包括以下步骤：d.将所述莱苞迪苷O4从所述介质分离以提供高度纯化的莱苞迪苷O4组合物。9.根据权利要求3、4、5或6所述的方法，其中所述起始组合物