用于检测运动性猝死相关基因的探针、基因芯片及试剂盒.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110577989A(43)申请公布日2019.12.17(21)申请号201910831612.8C12N15/11(2006.01)(22)申请日2019.09.04(71)申请人珠海赛乐奇生物技术股份有限公司地址519085广东省珠海市唐家湾镇金峰西路24号6栋5层申请人赛乐奇生物科技（南京）有限责任公司(72)发明人王丽玲谢红光肖杰杭建宋家武(74)专利代理机构广州嘉权专利商标事务所有限公司44205代理人郑晨鸣(51)Int.Cl.C12Q1/6883(2018.01)C12Q1/6837(2018.01)权利要求书2页说明书8页附图2页(54)发明名称用于检测运动性猝死相关基因的探针、基因芯片及试剂盒(57)摘要本发明属于生物检测技术领域，公开了用于检测运动性猝死相关基因的探针、基因芯片及试剂盒。所述探针包括探针I736I探针、I736T探针、P731P探针、P731S探针、R723R探针、R723G探针、R663R探针、R663H探针、Y842Y探针、Y842X探针、R190R探针、R190W探针、W305W探针、W305L探针、R2401R探针和R2401H探针。所述基因芯片上含有所述探针。所述试剂盒包括所述探针和基因芯片。本发明通过特异性探针和引物的选择，结合基因芯片的方法，具有特异性好、准确性高和快速方便的优势；通过基因芯片的可见光光学放大，能达到较高的信号分辨率；同时实现了运动性猝死相关基因的一次性多位点测定，减少了检测时间和成本；检测结果可由拍照或肉眼直接读取，简单方便。CN110577989ACN110577989A权利要求书1/2页1.一种用于检测运动性猝死相关基因的探针，其特征在于，所述探针的序列为：I736I探针：GTTCATTGATAGCAGGA；I736T探针：GTTCACTGATAGCAGGA；P731P探针：AGCGGCCATCCCTGAGGG；P731S探针：AGCGGCCATCTCTGAGGG；R723R探针：CCTCAGGTATCGCATCCT；R723G探针：CCTCAGGTATGGCATCCT；R663R探针：CAACTTGCGCTCCACCCA；R663H探针：CAACTTGCACTCCACCCA；Y842Y探针：GTGTACGAGATGCGCGTC；Y842X探针：GGTGTAGGAGATGCGCGT；R190R探针：CTCTGGGGGCGGCTGCGC；R190W探针：CTCTGGGGGTGGCTGCGC；W305W探针：CGCTGTGGTGGGGGGTGG；W305L探针：CGCTGTGGTTGGGGGTGG；R2401R探针：CTCTTGGGACGCTGTGCTC；R2401H探针：CTCTTGGGACACTGTGCTC。2.一种用于检测运动性猝死相关基因的基因芯片，其特征在于，含有权利要求1所述的探针。3.一种权利要求2所述基因芯片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)在衬底上镀膜，得到生物传感器；(2)在生物传感器上覆盖涂层，经6-肼基烟酸琥珀酰亚胺酯盐酸盐处理后，水洗；(3)将经修饰的探针点样在生物传感器上，制得基因芯片。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中采用醛基或氨基对探针的一端进行修饰。5.一种用于检测运动性猝死相关基因的试剂盒，其特征在于，包括权利要求2所述的基因芯片、PCR反应体系、杂交缓冲液、洗涤液、BW反应液和TMB显色液。6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应体系包括以下组分：5×Buffer，dUTPmix，F-引物，R-引物，Hottaq，UNG酶和ddH2O。7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述F-引物的序列为：663-F：5'-TGCATCTCTTTCTGGCATT-3'；723/731/736-F：5'-TCTATGGGCAGAGCAGATCAC-3'；842-F：5'-TGCGGCTGAACTTCGACC-3'；190-F：5'-GAGTACGTGGTCCGCCT-3'；305-F：5'-CATCTTCTCCTCGTACTTTGTG-3'；2401-F：5'-GGAACGCGATGACC-3'。8.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述R-引物的序列为：663-R：5'-CCTCACCTGGAGACTTTG-3'；723/731/736-R：5'-ACTGGTTGTGATCAATGTCCAG-3'；2CN110577989A权利要求书2/2页842-R：5'-AGGCTCACCGATAGGCAT-3'；190-R：5'-TCCACAGGGCAGGCATGACTC-3'；305-R：5'-CAC