高效液相色谱法测定胃得宁片中芍药苷含量.docx

高效液相色谱法测定胃得宁片中芍药苷含量【摘要】目的建立测定胃得宁片有效成分含量的方法。方法采用HPLC对胃得宁片中芍药苷的含量进行测定。流动相：甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾-醋酸-异丙醇（50：200：3：4）；检测波长：234nm。结果芍药苷在1.018～9.183μg之间具有良好的线性关系平均回收率为100.7%RSD=2.76%（n=5)。结论该方法灵敏、重现性好适用于胃得宁片中芍药苷的含量测定。【关键词】胃得宁片；芍药苷；高效液相色谱法【Abstract】ObjectiveTodevelopamethodforthedeterminationofpaeoniflorininWeideningtablet.MethodsAnHPLCmethodwasdevelopedmobilephase:methanol-0.05mol/Ldihydropotassiumphosphate-aceticacid-isopropylalcohol（50：200：3：4）wavelengthat234nm.ResultsLinearitywasfoundintherangeof1.018～9.183μgtheaveragerecoverywas100.7%RSD=2.76%(n=5).ConclusionThismethodisreliablerecurrentwellandsuitableforthedeterminationofpaeoniflorin.【Keywords】weideningtablet;paeoniflorin;HPLC本品系由白芍、甘草、丹参等10味中药材细粉及中药材提取物制成的片剂。具有理气健胃缓急止痛之功效。用于治疗浅表性胃炎、胃脘疼痛、胃炎气滞血瘀等症。为了控制胃得宁片的质量保证临床用药效果笔者对胃得宁片的质量标准进行了研究。本文以其中的君药白芍中芍药苷为指标采用高效液相色谱法测定其含量结果较为满意。1仪器与试剂美国Agilient1100高效液相色谱仪；ReliaSil-C18柱；德国SartoriusBP211D(1/10万)电子天平；芍药苷由中国药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱纯；其他试剂均为分析纯。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱:ReliaSil-C18（4.6mm×250mm5μm）;流动相:甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾-醋酸-异丙醇（50：200：3：4）［1］;流速:1.0ml/min;检测波长:234nm;柱温:室温。2.2对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量精密称定置5ml量瓶中加甲醇制成lml中含lmg的溶液摇匀即得。2.3供试品溶液的制备［1］取本品5片除去包衣研匀取2.0g精密称定置锥形瓶中精密加入甲醇50ml称定重量放置2h超声处理0.5h冷却至室温称定重量加甲醇补足减失的重量滤过滤液中加入活性炭0.2g水浴加热15min滤过用甲醇20ml洗滤渣合并洗液与滤液蒸干残渣加甲醇溶解定溶至5ml量瓶中作为供试品溶液。2.4阴性对照品溶液的制备取缺白芍的样品2.0g照供试品溶液的制备项下同法操作即得。2.5线性关系考察精密吸取芍药苷对照品溶液（5.04mg/5ml）1、3、5、7、9μl分别注入液相色谱仪依法测定根据对照品的峰面积积分值对芍药苷的进样量绘制标准曲线得回归方程：Y=1.180×106x－5.068×104r=0.9998。结果表明：芍药苷在1.018～9.183μg之间呈良好的线性关系由于标准曲线经过原点故采用外标一点法。色谱图见图1。1-芍药苷1-paeoniflorin图1芍药苷对照品（A）和胃得宁片（B）的HPLC图2.6方法学考察2.6.1精密度试验分别吸取4μl的对照品溶液重复进样5次测得其峰面积的RSD为1.52%。2.6.2稳定性试验精密吸取对照品溶液4μl于0、2、4、24、36h分别依法测定结果峰面积的RSD为1.53%芍药苷在36h内测定结果稳定。2.6.3重现性试验精密称取同一批样品5份按供试品溶液的制备和测试方法测定结果峰面积的RSD为1.28%。2.6.4回收率试验精密称取已知样品含量（1.386mg/g）的样品5份分别加入芍药苷对照品一定量按正文2.3项下操作测定并根据样品含量及芍药苷对照品加入量计算回收率。结果平均回收率为100.7%RSD