高效液相色谱法测定芎钩天麻丸中芍药苷的含量.docx

高效液相色谱法测定芎钩天麻丸中芍药苷的含量【摘要】目的建立高效液相色谱法测定芎钩天麻丸中芍药苷的含量。方法采用AgilengtEclipsePlus-C18色谱柱，流动相：乙腈-0.1%磷酸(14：86);流速：0.6ml•min-1;检测波长230nm。结果芍药苷在0.4800～8.160μg范围内线性关系良好(r=0.9999)，平均回收率为98.94%，RSD=0.36%(n=6)。结论本方法操作简便，专属性强，结果准确，可用于测定芎钩天麻丸中芍药苷的含量。【关键词】芎钩天麻丸;含量测定;芍药苷;高效液相色谱法[Abstract]ObjectiveToestablishaHPLCmethodforthedeterminationofPaeoniflorininxionggoutianmapills.MethodsThechromatographicsystemconsistedofC18column,usingAcetonitrile-0.1%Phosphate(14：86)asmobilephase.Thecontentwasdetectedatawavelengof230nm,theflowratewas0.6ml•min-1.ResultsThePaeoniflorinhaveagoodtincarrolatimintherangeof0.0433～0.6938μg(r=0.9999),theaveragerecoverywas98.94%，RSD=0.36%(n=6).ConolusionTheestablishedmethodisaccuracy,sensitiveandsimple.Itcanbeusedforqualitycontrolofxionggoutianmapills.[Keywords]xionggoutianmapills;Chlorogenicacid;contentdetermination;HPLC芎钩天麻丸是由川芎、钩藤、当归、石决明、桑寄生、细辛、珍珠母、黄芩、白芍、天麻等14味药材加工制成的医院制剂，具有滋肾平肝、潜阳熄风、除晕止痛、降血压之功效，主治肝阳上亢、血虚失养引起的高血压，紧张性、血管性神经性头疼、头晕[1]。白芍为方中君药，芍药苷为白芍的主要有效成分，具有扩张血管、保护脑缺血、抗血栓、抗血小板聚集、抗高血脂等作用，对芎钩天麻丸疗效的发挥起重要作用。现行质量标准中未收载含量测定项目，不能有效的控制药品质量。本文以芍药苷为指标成分，建立了测定芎钩天麻丸中芍药苷的高效液相测定法，为该制剂的质量控制提供了客观的含量评价方法。1仪器与试药1.1仪器Agilengt1260高效液相色谱仪，AUW-220D电子分析天平DSQ10260超声仪。1.2试药芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号:110736-201035);乙腈为色谱纯，水为本单位自制重蒸馏水，其余试剂为分析纯。芎钩天麻丸由柘城县人民医院提供。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：AgilengtEclipsePlus-C18色谱柱(4.6×100mm)流动相：乙腈-0.1%磷酸(14：86)为流动相[2];流速0.6ml•min-1;检测波长230nm;进样量10μl;理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000[3]。2.2线性关系考察取黄芩苷对照品约12.0mg，精密称定，置25ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。按照2.1项色谱条件，分别进样1、3、5、7、9、11、13、15、17μl，记录芍药苷峰面积值，以峰面积积分值(Y)对对照品浓度(X)进行线性回归，得回归方程：Y=235.05674X+12.52003r=0.9999。结果表明，黄芩苷对照品在0.4800～8.1600μg范围内与峰面积值呈良好的线性关系。2.3供试品溶液及阴性对照溶液的制备取本品约0.1g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，浸泡4小时，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45um微孔滤膜滤过，续滤液作为供试品溶液。另取缺白芍的'其他味药按处方工艺制成阴性制剂，按上述方法制备阴性对照溶液。2.4干扰试验取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各10μl，按照2.1项色谱条件，分别进样测定，记录色谱图，黄芩苷的保留时间为8.818min，理论塔板数为3512，黄芩苷与相邻峰的分离度大于1.5，峰型对称。阴性样品无干扰，结果见图1。C阴性对照溶液图1高效液相色谱图2.5精密度试验取2.2对照品溶液，重复进样6次，每次10μl，记录绿原酸峰面积，RSD=0.39