一种温胆片中三萜成分的含量检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112014498A(43)申请公布日2020.12.01(21)申请号202010850093.2(22)申请日2020.08.21(71)申请人漳州片仔癀药业股份有限公司地址363000福建省漳州市上街(72)发明人袁慧君于娟侴桂新连赟芳(74)专利代理机构南京经纬专利商标代理有限公司32200代理人唐循文(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/86(2006.01)权利要求书2页说明书19页附图3页(54)发明名称一种温胆片中三萜成分的含量检测方法(57)摘要本发明公开了一种温胆片中三萜成分的含量检测方法。该方法采用一标多测法，针对组分的特殊性，优化HPLC中的各个步骤，以茯苓酸为内参物,确定其与去氢茯苓酸、松苓新酸的相对校正因子，最终建立的测定方法准确度、重复性、稳定性均良好，检测结果与外标法对比无明显差异。本发明实现了温胆片中多个成分(茯苓酸、去氢茯苓酸、松苓新酸)的同步定量测定，从而更全面、高效地对温胆片进行质量控制，有利于提高温胆片质量标准，并且降低了购买对照品的检测成本，具有良好的应用价值。CN112014498ACN112014498A权利要求书1/2页1.一种温胆片中三萜成分的含量检测方法，其特征在于，以茯苓酸为对照物，测定温胆片中茯苓酸、去氢茯苓酸、松苓新酸的含量；所述含量检测方法包括以下步骤：步骤1，供试品溶液制备取温胆片研磨成粉，称取1-5重量份的粉末，向粉末中加入20-30倍重量的甲醇溶液，超声提取20-40min后，用甲醇补足失重，离心，量取10-15倍粉末重量的上清液，浓缩至干，再向残渣加体积分数为70％甲醇至溶解，采用固相萃取小柱处理，收集洗脱液并浓缩至干，加甲醇溶解，定容，过滤，续滤液即为供试品溶液；步骤2，对照品溶液制备精密称定茯苓酸，向茯苓酸中加5-10倍重量的甲醇制成对照品溶液；步骤3，色谱条件色谱柱以十八烷基键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动A相，以磷酸水溶液为流动B相，梯度洗脱；流速0.8-1.2ml/min；柱温：20-30℃；检测器波长：202-218nm；步骤4，测定将供试品溶液与对照品溶液，注入液相色谱仪，按照步骤3的设定的色谱条件，测定供试品溶液，以茯苓酸为内参物，根据去氢茯苓酸、松苓新酸与茯苓酸之间的相对校正因子f，计算得到温胆片中去氢茯苓酸、松苓新酸的含量。2.根据权利要求1所述的一种温胆片中三萜成分的含量检测方法，其特征在于，步骤1中固相萃取小柱为以硅胶为基质的反相萃取柱。3.根据权利要求1所述的一种温胆片中三萜成分的含量检测方法，其特征在于，步骤3中的磷酸水溶液质量溶度为0.1％～0.3％，梯度洗脱条件如下表所示：表中A(％)表示A相体积占流动相体积的百分比，B(％)表示B相体积占流动相体积的百分比。4.根据权利要求3所述的一种温胆片中三萜成分的含量检测方法，其特征在于，流动相所用磷酸的体积分数为0.2％。5.根据权利要求1所述的一种温胆片中三萜成分的含量检测方法，其特征在于，检测波长为210nm，流动相的流速为1.0ml/min，柱温为25℃。6.根据权利要求1所述的一种温胆片中三萜成分的含量检测方法，其特征在于，步骤3中色谱柱为所述色谱柱为InertsilODS-3、CAPCELLPAKADME、纳普分析ChromCoreC18，或ThermoSyncronisC18。7.根据权利要求1所述的一种温胆片中三萜成分的含量检测方法，其特征在于，步骤42CN112014498A权利要求书2/2页中的去氢茯苓酸与茯苓酸之间的相对校正因子为1.54，松苓新酸与茯苓酸之间的相对校正因子为0.91，通过公式f＝(As×Ci)/(Ai×Cs)分别计算得到去氢茯苓酸、松苓新酸的含量；其中，As为供试品溶液色谱图中茯苓酸的峰面积，Ci为温胆片中待测成分的含量，Ai为供试品溶液色谱图中待测成分的峰面积，Cs为温胆片中茯苓酸的含量。3CN112014498A说明书1/19页一种温胆片中三萜成分的含量检测方法技术领域[0001]本发明属于中药检测方法技术领域，具体涉及一种温胆片中三萜成分的含量检测方法。背景技术[0002]对中药而言，多组分、多靶点作用是其中药的特点，这也决定了单一成分难以准确评价中药质量，因此多指标含量测定对于中药质量控制具有重要意义。目前，使用常规方法以多个成分含量测定来评价某种药材质量的研究虽早有报道，但由于多数对照品不易获得、价格昂贵等问题，限制了这些方法在科研、实际生产等中的应用。一测多评(Quantitativeanalysisofmulticomponentsbysingle-marker，QAMS)可利用一种相对易