一种降糖复方中药提取液中总多糖含量的测定.pdf

一种降糖复方中药提取液中总多糖含量的测
定

高伟，王晓娟，刘翊，杜连祥

【摘要】目的成立分光光度法测定降糖复方中药提取液中总

多糖的含量。方式紫外分光光度法，苯酚－硫酸法。结果该方式的线

性范围为5～40μg/ml，r=3，平均回收率为％，RSD=％。结论该方

式简便易行，重现性良好。

【关键词】复方降糖中药提取液；总多糖；紫外分光光度法；

含量测定

由黄芪、荔枝核、山楂叶、银合欢种子按必然的比例混合，

经必然的提取工艺加工取得的提取液，经药理实验说明，具有专门好

的降低血糖、调剂血脂的作用。多糖为其要紧有效成份之一。本文采

纳紫外分光光度法、苯酚－硫酸法对该提取液中的总多糖进行含量测

定，为其质量标准的研究与指标的制定提供实验依据。结果说明本法

简便灵敏快速易行，可用于操纵该产品的质量。

1仪器与试药

仪器核酸蛋白分析仪由广州雷得生物技术生产。

试药降糖复方中药提取液由本院自行制作；葡萄糖标准品：

中国药品生物制品查验所出品；浓硫酸、苯酚、乙醇均为分析纯。

2方式与结果

葡萄糖标准品溶液的制备周密称取105℃干燥至恒重的无

水葡萄糖标准品5mg，置100ml容量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至

刻度，摇匀，即得每毫升中含无水葡萄糖mg的溶液作为标准品溶液。

供试品溶液的制备降糖复方中药提取液的浓度为生药50

g/100ml，周密移取降糖复方中药提取液ml至离心管中，3500r/min

离心5min，搜集上清液至离心管中，加入10ml无水乙醇，3500r/min

离心10min，倾去上清液，所得沉淀水浴蒸干，加蒸馏水10ml，水

浴30min，转移至25ml容量瓶中，定容，备用。

最大吸收波长的确信［1］别离周密移取葡萄糖标准品溶液

30μl及供试品溶液30μl置于10ml具塞试管中，各加入蒸馏水

至1ml，然后各加入5%的苯酚溶液ml，摇匀，迅速加入浓硫酸ml，

振摇5min，滚水浴中加热15min，冰水浴中冷却30min，掏出。以

蒸馏水同上操作制备空白溶液。用核酸蛋白分析仪在200～700nm范

围内扫描，由扫描结果可知，葡萄糖标准品和供试品的最大吸收波长
均为485nm。

标准曲线的制备周密移取标准品溶液，，，，，ml别离置于

10ml具塞试管中，加水至1ml，别离加入5％的苯酚溶液ml，迅速

加入浓硫酸ml，振摇5min，滚水浴15min，冰水浴30min，掏出，

以第1份为空白，于核酸蛋白分析仪系统中，在485nm处测定吸光度，

结果见表1。

表1标准曲线的制备（略）

上述实验数据通过计算得回归方程：A=+8，r=3，结果说

明葡萄糖浓度在5～40μg/ml范围内线性关系良好。

稳固性实验按“”项方式操作，每隔30min对同一供试品

溶液测定吸光度一次，结果说明，供试液在3h内显色稳固，见表2。

表2稳固性实验结果（略）

重现性实验同一批样品，各周密吸取ml共5份，制备供

试品溶液，各周密吸取供试品溶液30μl，照标准曲线的制备项下方

式测定吸光度别离为，，，，，RSD为%（n=5）。说明本方式重现性良好。

周密度实验周密吸取同一供试品溶液30μl共5份，照标
准曲线的制备项下方式测定吸光度别离为，，，，，RSD为％（n=5）。

加样回收率实验在已知含量的同一批样品中，吸取样品溶

液约1ml共5份，别离周密加入必然量的葡萄糖标准品，制备供试品

溶液，照标准曲线的制备项下方式显色并测定吸光度，计算回收率，

回收率（%）＝（实验测值－样品所含被测成份量）/加入纯品量×100％

［2］，结果测得平均回收率为％，RSD=％（n=5）。结果见表3。

表3多糖加样回收率测定（略）

样品含量测定周密移取3批样品溶液ml，制备供试品溶

液，周密移取30μl置具塞试管中，加蒸馏水补充至1ml，同标准

曲线的制备项下操作，在485nm处测定吸光度，别离为，，，依照回归

方程计算，以从提取液中所含的生药中提取的总多糖百分比计即

为%，%，%。结果说明浓度为生药50g/100ml的样品，总多糖含量为

g/100ml。

3讨论

本文采纳苯酚－硫酸显色法，以葡萄糖计算测定复方中药提

取液中总多糖的含量。苯酚－硫酸比色法是由于糖类与苯酚－硫酸反

映生成橙黄色产物，与糖含量成正比，适用于单糖、寡糖、多糖等多
种糖类的测定［3］。多糖在硫酸作用下水解成单糖，并迅速脱水生成

糖醛衍生物，与苯酚缩合成有色化合物，然后用分光光度法测定其含

量［4，5］。通过线性关系考察、稳固性、重现性、周密度和加样回收

率实验及样品含量测定结果，说明本方式