一种人源细胞多肽提取及应用方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112391433A(43)申请公布日2021.02.23(21)申请号202011241795.7A61K8/68(2006.01)(22)申请日2020.11.09A61K8/31(2006.01)A61K8/64(2006.01)(71)申请人山东发现生物技术有限公司A61K8/9789(2017.01)地址250100山东省济南市章丘区经十东A61K8/34(2006.01)路以南、明埠路以西6866号山东省药A61Q19/00(2006.01)物研究院三楼南侧东一室(72)发明人李胜刘丽婕苏昕申敏(74)专利代理机构北京科家知识产权代理事务所(普通合伙)11427代理人宫建华(51)Int.Cl.C12P21/06(2006.01)C07K1/34(2006.01)A61K8/49(2006.01)A61K8/73(2006.01)权利要求书2页说明书4页附图1页(54)发明名称一种人源细胞多肽提取及应用方法(57)摘要本发明提供一种人源细胞多肽提取及应用方法，涉及生物技术领域。该人源细胞多肽提取及应用方法，包括以下步骤：S1、预提取环境调节：将预备的人源细胞加入氯化氢溶液中振荡摇匀，并对混合物煎煮至糊化后冷却备用，S2、初步酶解：取S1中备用混合物加入胃蛋白酶和纯净水，振荡摇匀后置入恒温设备中进行初次酶解备用。该人源细胞多肽提取及应用方法，采用本发明的方法，能够高效进行人源细胞中多肽的提取，进而有效提高实际多肽产量，有效减少多肽衍生物生产成本，提高实际多肽衍生物的经济收益，同时制取的化妆品能够同时具备多种护肤效果，减少使用者实际化妆品购买数量，减少使用者实际购买成本。CN112391433ACN112391433A权利要求书1/2页1.一种人源细胞多肽提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、预提取环境调节：将预备的人源细胞加入氯化氢溶液中振荡摇匀，并对混合物煎煮至糊化后冷却备用；S2、初步酶解：取S1中备用混合物加入胃蛋白酶和纯净水，振荡摇匀后置入恒温设备中进行初次酶解备用；S3、二次提取环境调节：向S2中备用溶液中加入氢氧化钠溶液，振荡摇匀后备用；S4、二次酶解：取S3中备用溶液加入胰蛋白酶，振荡摇匀后置入恒温设备中进行二次酶解备用；S5、过滤提纯：将S4中备用溶液加热至沸腾，待沸腾溶液冷却至3-7℃后，使用微滤膜进行沸腾溶液的加压过滤，并将过滤后溶液置于离心机中进行离心处理，取离心后中间澄清也备用；S6、储存环境调节：向S5中间澄清液中加入浓度为2mol/L的氯化氢溶液至中间澄清液PH值为7，并经过真空低温浓缩和真空冷冻干燥后制得多肽提取物。2.根据权利要求1所述的一种人源细胞多肽提取方法，其特征在于，根据S1中操作步骤，所述氯化氢溶液浓度为1.5mol/L，所述氯化氢溶液PH值为2-3。3.根据权利要求1所述的一种人源细胞多肽提取方法，其特征在于，根据S2中操作步骤，所述恒温设备温度为40-60℃，所述恒温设备运行时间为10-12h，所述胃蛋白酶含量为氯化氢溶液总质量的1％-3％。4.根据权利要求1所述的一种人源细胞多肽提取方法，其特征在于，根据S3中操作步骤，所述氢氧化钠溶液浓度为1mol/L，所述氢氧化钠PH值为7-10。5.根据权利要求1所述的一种人源细胞多肽提取方法，其特征在于，根据S4中操作步骤，所述恒温设备温度为40-60℃，所述恒温设备运行时间为3-4h，所述胰蛋白酶含量为氯化氢溶液总质量的3％-4％。6.根据权利要求1所述的一种人源细胞多肽提取方法，其特征在于，根据S5中操作步骤，所述加热沸腾时间为15-25min，所述加压条件为0.1-0.3MPa，所述离心机转速为3000-3500r/min。7.根据权利要求1-6中任意一项所述的一种人源细胞多肽提取方法的应用，其特征在于，包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠6-18份、透明质酸钠6-18份、神经酰胺2-14份、天然香精3-15份、角鲨烷7-19份、肉豆蔻醇4-16份、红景天提取液5-17份、助乳化剂2-14份、多肽提取物1-13份。8.根据权利要求7所述的一种人源细胞多肽提取及应用方法，其特征在于，包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠8-16份、透明质酸钠8-16份、神经酰胺4-12份、天然香精5-13份、角鲨烷9-17份、肉豆蔻醇6-14份、红景天提取液7-15份、助乳化剂4-12份、多肽提取物3-11份。9.根据权利要求7所述的一种人源细胞多肽提取及应用方法，其特征在于，包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠10-14份、透明质酸钠10-14份、神经酰胺6-10份、天然香精7-11份、角鲨烷11-15份、肉豆蔻醇8-12份、红景天提取液9-13份、助乳化剂6