一种腰果多肽及其提取方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111138514A(43)申请公布日2020.05.12(21)申请号202010017084.5C12P21/06(2006.01)(22)申请日2020.01.08A23L33/18(2016.01)A61P37/08(2006.01)(71)申请人海南大学地址570228海南省海口市美兰区人民大道58号(72)发明人陈笛曹献英(74)专利代理机构重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙)50230代理人陈炳萍(51)Int.Cl.C07K7/06(2006.01)C07K1/36(2006.01)C07K1/34(2006.01)C07K1/30(2006.01)C07K1/16(2006.01)权利要求书1页说明书6页序列表1页附图6页(54)发明名称一种腰果多肽及其提取方法和应用(57)摘要本发明涉及多肽技术领域，公开了一种腰果多肽，本发明还公开了一种腰果多肽的制备方法，本发明还公开了一种腰果多肽在制备抗过敏保健食品和药品中的应用。本发明从腰果蛋白中获得了纯度高、分子量低且具有显著的抗过敏效应的腰果多肽，本发明在脱脂处理中充分将腰果破碎，提高了腰果的利用率，本发明的提取方法对环境友好，安全性好，无溶剂残留，能耗和成本均较低，且条件温和，提取体系中的降解产物一般不会与提取物发生反应，能够有效地保护可利用成分的品质和生物功能；本发明所需要的设备简单且操作安全，提取温度低，蛋白质不易变性，制备的腰果多肽可作为保健食品和医药品的原料，具有显著的经济、环境和社会效益。CN111138514ACN111138514A权利要求书1/1页1.一种腰果多肽，其特征在于，腰果多肽的氨基酸序列为：IleIleAlaIleProAlaGlyValAlaHis。2.权利要求1所述的一种腰果多肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：脱脂处理破碎新鲜腰果，按溶剂比1:6加入石油醚，常温下连续搅拌处理4h，抽滤后40℃烘干后再破碎一次，60目过筛得到脱脂腰果粉；S2：提取腰果蛋白将步骤S1中的脱脂腰果粉与水按溶剂比1:40在40℃且pH为10的条件下处理2h，离心去除沉淀并得到上清液，调节上清液的pH至4.5后静置30min，离心15min，收集沉淀，冷冻干燥得腰果蛋白；S3：将步骤S2中得到的腰果蛋白用碱性蛋白酶酶切后，用沸水浴灭酶10min，5000r/min离心20min后取上清，冷冻干燥得粗腰果多肽粉；S4：将步骤S3中得到的粗腰果多肽粉经3kDa超滤膜、葡聚糖凝胶层析柱和C18柱分离纯化，冷冻干燥得腰果多肽。3.根据权利要求2所述的一种腰果多肽的制备方法，其特征在于，步骤S3中的碱性蛋白酶是由地衣芽胞杆菌经发酵提炼而成的蛋白水解酶，主要成分为地衣芽胞杆菌蛋白酶，蛋白酶活为200000U/g。4.根据权利要求2所述的一种腰果多肽的制备方法，其特征在于，步骤S3中的酶切条件如下：酶切时间为3-5h，温度为35-65℃，pH为9-12.5，底物腰果蛋白的浓度为30-70g/L，碱性蛋白酶的加酶量为5-8％。5.根据权利要求4所述的一种腰果多肽的制备方法，其特征在于，步骤S3中的酶切条件如下：酶切时间为5h，温度为42.5℃，pH为11.5，底物腰果蛋白的浓度为40g/L，碱性蛋白酶的加酶量为8％。6.根据权利要求2所述的一种腰果多肽的制备方法，其特征在于，步骤S4中的葡聚糖凝胶层析柱为Sephadex-G50凝胶层析柱，使用时用2倍柱体积的超纯水平衡Sephadex-G50凝胶层析柱，并采用2倍柱体积超纯水洗脱，洗脱流速为0.8mL/min，粗腰果多肽粉的上样浓度为100mg/mL，上样体积为1mL。7.权利要求1所述的一种腰果多肽在制备抗过敏保健食品和药品中的应用。2CN111138514A说明书1/6页一种腰果多肽及其提取方法和应用技术领域[0001]本发明涉及多肽技术领域，具体涉及一种腰果多肽及其提取方法和应用。背景技术[0002]腰果的营养十分丰富，富含脂肪、蛋白质、碳水化合物和多种维生素和矿物质，腰果具有抗氧化、防衰老、抗肿瘤和抗心血管病的作用。腰果中所含的蛋白质是一般谷类作物的2倍之多，并且所含氨基酸的种类与谷物中氨基酸的种类互补。刘义军和叶婧等的研究表明除色氨酸外，腰果蛋白中富含17种氨基酸，其中包括亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸等7种人体必需氨基酸，且含量皆高于FAO/WHO/UNO成人推荐标准；非必需氨基酸中的谷氨酸和精氨酸含量较高，且其氨基酸组成比例与WHO建议的人体氨基酸模式非常接近，优于其它坚果类产品如杏仁、榛子、核桃等。目前市场上的动物源多肽占大多数，植物源多肽的成本优势使植物源多肽成为研究的新亮点，腰果蛋白便可作为优质植物蛋白资源进行