牡蛎酶解物的制备方法及应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN101972004A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN101972004A(43)申请公布日2011.02.16(21)申请号201010268704.9(22)申请日2010.09.01(71)申请人江苏大学地址212013江苏省镇江市学府路301号(72)发明人董英周越孙芳芳(74)专利代理机构南京知识律师事务所32207代理人汪旭东(51)Int.Cl.A23L1/33(2006.01)A23L1/29(2006.01)A23L1/30(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图1页(54)发明名称牡蛎酶解物的制备方法及应用(57)摘要本发明公开了一种制备具有抗氧化和延缓衰老活性的牡蛎酶解物的方法及应用，包括以下步骤：以干燥的牡蛎粉为原料，配成蛋白质量分数为2％的水溶液，52.5-55℃水浴浸泡30分钟，然后以组合蛋白酶先后或同时水解；各蛋白酶的加酶量为6000-8000U/g底物蛋白，调pH6.0-7.0，温度为52.5-55℃下水解2小时，酶解液离心后，上清液用截留分子量为1kDa的超滤膜超滤；截留液进行喷雾干燥，获得牡蛎酶解物。可以用来制备具有抗氧化活性的食品添加剂或者具有延缓衰老的营养食品。本发明具有原料来源广泛、制备工艺简单、效率高、无污染等优点；酶解物具有较强的抗氧化活性及明显的延缓衰老作用。CN109724ACN101972004A权利要求书1/1页1.牡蛎酶解物的制备方法，其特征在于采用组合酶解工艺，包括以下步骤：以牡蛎粉于水中配成蛋白质量分数为2％的水溶液，反应器中52.5℃-55℃水浴浸泡30分钟，然后先后或同时加入组合蛋白酶进行水解；各蛋白酶的加酶量为6000-8000U/g底物蛋白，用磷酸缓冲液调节pH6.0-7.0，反应温度为52.5-55℃的条件下水解2小时，煮沸10min灭酶；离心各酶解液，取上清液用截留分子量为1kDa的超滤膜超滤，截留液进行喷雾干燥，获得牡蛎酶解物；其中所述的组合蛋白酶为中性蛋白酶与复合风味酶。2.权利要求1所述的牡蛎酶解物的制备方法，其特征在于在温度55℃，pH6.0，同时加入两种酶量为6000U/g底物蛋白的中性蛋白酶与复合风味酶进行酶解。3.权利要求1或2所述的牡蛎酶解物的应用，可以制备具有抗氧化活性的食品、食品配料或保健品。4.权利要求1或2所述的牡蛎酶解物的应用，可以制备具有延缓衰老的营养食品或保健品。2CN101972004A说明书1/6页牡蛎酶解物的制备方法及应用技术领域[0001]本发明涉及制备一种具备延缓衰老活性的牡蛎蛋白酶解物的方法，可以作为抗氧化、延缓衰老营养素或药物添加，属于海洋生物技术应用领域。背景技术[0002]牡蛎，俗称海蛎子、蚝，是世界上第一大养殖贝类，也是我国四大养殖贝类之一，广泛分布于我国辽宁、山东、福建及广东沿海等地。牡蛎肉嫩味鲜，药食兼用，在我国已有几百年的历史，素有“海中牛奶”的美称，是我国首批列为药食同源的保健疗效食品之一。牡蛎的蛋白质含量可高达50％，且氨基酸组成完全。牡蛎肉中还含有丰富的糖原、二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)等不饱和脂肪酸、维生素以及硒和锌等矿物质。近十年来，酶制剂在海洋贝类资源加工过程中得到了普遍的应用，贝类蛋白酶解工艺及其酶解物功效的研究不断进展。目前，酶解技术已经成为海洋贝类蛋白资源高值化、资源化、生态化开发利用的重要手段。但是，如何借鉴和突破传统酶解技术与工艺，对海洋贝类蛋白资源的绿色高值化开发，仍是我国贝类资源综合利用中一个重要的研究领域。发明内容[0003]本发明以牡蛎粉为原料，采用组合酶解技术获得牡蛎酶解物，显著优于各种单一酶水解的效果。通过各种抗氧化检测体系确证了牡蛎组合酶解物具有显著的抗氧化活性；并采用果蝇生存实验、小鼠肝组织中过氧化脂质含量和抗氧化酶活性等指标的测定，确证牡蛎组合酶解物具有显著的延缓衰老活性。选择此新工艺制备的酶解物具有的显著生物活性，可实现牡蛎的高值化利用。[0004]本发明是通过以下技术手段实现的，组合酶解工艺：以牡蛎粉于水中配成蛋白质量分数为2％的水溶液，反应器中52.5℃-55℃水浴浸泡30分钟，然后先后或同时加入组合蛋白酶进行水解；各蛋白酶的加酶量为6000-8000U/g底物蛋白，用磷酸缓冲液调节pH6.0-7.0，反应温度为52.5-55℃的条件下水解2小时，煮沸10min灭酶；离心各酶解液，取上清液用截留分子量为1kDa的超滤膜超滤，截留液进行喷雾干燥，获得牡蛎酶解物；其中所述的组合蛋白酶为中性蛋白酶与复合风味酶。优选在温度55℃，pH6.0，同时加入两种酶量为6000U/g底物蛋白的中性蛋白酶与复合风味酶。[0005]上述牡蛎酶解物的应用之一，以其清除DPPH·、·OH、超氧阴离子自由基