一种检测赭曲霉毒素A的试纸条及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CN104569399A(43)申请公布日(43)申请公布日2015.04.29(21)申请号201310499110.2(22)申请日2013.10.22(71)申请人北京勤邦生物技术有限公司地址102206北京市昌平区回龙观国际信息产业基地高新四街8号(72)发明人万宇平何方洋冯才伟罗晓琴冯静赵正苗崔海峰余厚美(51)Int.Cl.G01N33/577(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图2页(54)发明名称一种检测赭曲霉毒素A的试纸条及其应用(57)摘要本发明公开了一种检测赭曲霉毒素A的试纸条及其应用。试纸条包括样品吸收垫（1）、结合物释放垫（2）、反应膜（3）、吸水垫（4）和底板（7），所述反应膜上具有包被有赭曲霉毒素A半抗原-载体蛋白偶联物的检测线（5）和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线（6），所述结合物释放垫（2）喷涂有赭曲霉毒素A单克隆抗体-胶体金标记物。本发明还提供了一种应用上述赭曲霉毒素A试纸条检测谷物及饲料中赭曲霉毒素A残留的方法。本发明所提供的试纸条具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低等特点，适合大量样本的筛查和现场监控。CN104569399ACN104569399A权利要求书1/1页1.一种检测赭曲霉毒素A的试纸条，包括样品吸收垫（1）、结合物释放垫（2）、反应膜（3）、吸水垫（4）和底板（7），其特征在于所述反应膜上具有包被有赭曲霉毒素A半抗原-载体蛋白偶联物的检测线（5）和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线（6），所述结合物释放垫（2）喷涂有赭曲霉毒素A单克隆抗体-胶体金标记物。2.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于所述样品吸收垫（1）、结合物释放垫（2）、反应膜（3）、吸水垫（4）依次粘贴在底板（7）上。3.如权利要求1-2任一项所述的试纸条，其特征在于所述结合物释放垫1/3～1/2被覆盖于样品吸收垫下。4.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于所述赭曲霉毒素A半抗原-载体蛋白偶联物由赭曲霉毒素A半抗原与载体蛋白偶联得到，所述载体蛋白可为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白、人血清白蛋白。5.如权利要求1或4任一项所述的试纸条，其特征在于所述赭曲霉毒素A半抗原是由赭曲霉毒素A与对苯二胺反应得到，其分子结构式为：6.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于所述赭曲霉毒素A单克隆抗体是以赭曲霉毒素A半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得，所述羊抗鼠抗抗体是将鼠源抗体免疫羊得到。7.一种制备权利要求1-6任一项所述试纸条的方法，其包括步骤：1）制备喷涂有赭曲霉毒素A单克隆抗体-胶体金标记物的结合物释放垫；2）制备具有包被有赭曲霉毒素A半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线的反应膜；3）将1）和2）制备好的结合物释放垫、反应膜与样品吸收垫、吸水垫和底板组装成试纸条。8.一种检测谷物及饲料中赭曲霉毒素A残留的方法，其包括步骤：1）样本前处理；2）用权利要求1-6任一项所述的试纸条进行检测；3）分析检测结果。2CN104569399A说明书1/7页一种检测赭曲霉毒素A的试纸条及其应用技术领域[0001]本发明涉及一种检测赭曲霉毒素A的试纸条及其应用，具体涉及一种用于检测赭曲霉毒素A的胶体金试纸条，其特别适用于黄豆、玉米等谷物及饲料（原料、配合料、浓缩料）中赭曲霉毒素A残留的检测。背景技术[0002]赭曲霉毒素A是由多种生长在粮食（小麦、玉米、大麦、燕麦、黑麦、大米和黍类等）、花生、蔬菜（豆类）等农作物上的曲霉和青霉产生的。动物摄入了霉变的饲料后，这种毒素也可能出现在猪和母鸡等的肉中。赭曲霉毒素A主要侵害动物肝脏与肾脏。这种毒素主要是引起肾脏损伤，大量的毒素也可能引起动物的肠黏膜炎症和坏死。OA产生菌广泛分布于自然界，对人类健康和畜牧业发展构成潜在威胁。我国对配合饲料和玉米中OA的允许量为≤100μg/kg，谷类和豆类的限量≤5μg/kg。[0003]目前检测粮食和饲料中OA的仪器方法有液相色谱、气相色谱、质谱和毛细管电泳法等，这些方法灵敏度较高，结果稳定，但所需仪器设备昂贵，样品准备耗时长，不适于大量样品的现场筛选，限制了其应用。因此，针对现有赭曲霉毒素A检测技术上的不足，我们设计了一种用胶体金免疫层析技术检测黄豆、玉米等谷物及饲料（原料、配合料、浓缩料）赭曲霉毒素A的方法，该方法特异性好、灵敏度高、操作简便、检测成本低、适合于批量样品的筛选检测，是理想的快速筛选手段，能够更好地满足我国食品企业、政府职能监管部门等开展检测工作。发明内容[0004]本发明的目的是提供一种灵敏度高、操作简单、成本低、检测时间短的赭曲霉毒素A残留检测试纸条。[0005]本发明所提供的检测赭曲霉毒素A残留的试纸条，