一种用于治疗白血病的甾体类化合物及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105418717A(43)申请公布日2016.03.23(21)申请号201511018427.5(22)申请日2015.12.30(71)申请人吴金凤地址213003江苏省常州市钟楼区延陵西路名骏家园2号楼2407室(72)发明人吴金凤(51)Int.Cl.C07J9/00(2006.01)A61K31/575(2006.01)A61P35/02(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图1页(54)发明名称一种用于治疗白血病的甾体类化合物及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种用于治疗白血病的甾体类化合物及其制备方法。该化合物为首次报道，是一种结构新颖的甾体类化合物，可以从干燥的千金子中提取、分离纯化得到。体外试验证明该化合物作用Molt4细胞后能够诱导其显著的周期阻滞和凋亡，并使细胞周期停留于S期，从而诱导细胞凋亡，抑制细胞增殖。化合物(Ⅰ)在治疗急性T淋巴细胞白血病方面具有潜在的应用价值，可以进一步用来开发成治疗急性T淋巴细胞白血病的药物。CN105418717ACN105418717A权利要求书1/1页1.具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，2.权利要求1所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，其特征在于包含以下操作步骤：(a)将干燥的千金子粉碎，用70～80％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱8个柱体积，再用80％乙醇洗脱10个柱体积，收集80％乙醇洗脱液，减压浓缩得80％乙醇洗脱物浸膏；(c)步骤(b)中80％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为75:1、45:1、25:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1、15:1和8:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70％的甲醇水溶液等度洗脱，收集10～12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)。3.根据权利要求2所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，其特征在于：所述大孔树脂为D101大孔吸附树脂。4.根据权利要求2所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，其特征在于：所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为75％。5.一种药物组合物，其特征在于：其中含有治疗有效量的权利要求1所述的化合物(Ⅰ)和药学上可接受的载体。6.权利要求1所述的化合物(Ⅰ)在制备治疗急性T淋巴细胞白血病的药物中的应用。7.权利要求5所述的药物组合物在制备治疗急性T淋巴细胞白血病的药物中的应用。2CN105418717A说明书1/6页一种用于治疗白血病的甾体类化合物及其制备方法技术领域[0001]本发明属于药物技术领域，具体涉及从干燥的千金子中分离得到的一种具有治疗急性T淋巴细胞白血病作用的甾体类化合物及其制备方法。背景技术[0002]千金子亦称千两金、菩萨豆、续随子、联步、滩板救，为大戟科植物续随子EuphorbialathyrisL.的干燥成熟种子，是我国传统中药材之一。千金子性温，味辛，具有逐水消肿、破癥杀虫之功，用于水肿胀满、痰饮、宿滞、癥瘕积聚、妇女闭经、疥癣疮毒、蛇咬、疣赘。在我国主要生长于河北、河南、浙江,此外四川、辽宁、吉林、湖南、广西等地亦产。国外则主要广泛分布于中欧、南欧、俄国南部、南美、北美及澳大利亚。[0003]综合文献报道，千金子含有47％～50％的脂肪油，15％的蛋白质，还主要含有甾醇、二萜酯及游离的二萜醇、香豆素类及其他化合物。[0004]现在研究表明千金子具有抗肿瘤作用、抗菌作用、致泻作用、镇静催眠及镇痛抗炎作用、抑制黑色素生成作用等。发明内容[0005]本发明的目的是提供一种从干燥的千金子中分离得到的一种具有治疗急性T淋巴细胞白血病作用的甾体类化合物及其制备方法。[0006]本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：[0007]具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，[0008][0009]所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将干燥的千金子粉碎，用70～80％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱8个柱体积，再用80％乙醇洗脱10个柱体积，收集80％乙醇洗脱液，减压浓缩得80％乙醇洗脱物浸膏；(c)步骤(b)中80％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为75:1、45:1、25:1、15:1和1