一种利用水产蛋白高温发酵制备活性肽的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105624242A(43)申请公布日2016.06.01(21)申请号201610129705.2(22)申请日2016.03.09(83)生物保藏信息GDMCCNo：600032016.01.18(71)申请人广东海洋大学地址524088广东省湛江市麻章区海大路1号(72)发明人洪鹏志刘唤明周春霞杨萍(51)Int.Cl.C12P21/00(2006.01)C07K1/34(2006.01)C12R1/10(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种利用水产蛋白高温发酵制备活性肽的方法(57)摘要本发明公开了一种利用水产蛋白高温发酵制备活性肽的方法，包括以下主要步骤：将新鲜的水产蛋白绞碎；绞碎后的水产蛋白加入到发酵罐中，并添加营养物和水混匀作为发酵培养基；发酵罐中接入能产耐高温蛋白酶的地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）HL-3于55℃～60℃进行好氧发酵42h～48h；发酵结束后，发酵液先后经过滤、超滤和纳滤后得到浓缩液，浓缩液经冷冻干燥后得到活性肽成品。本发明技术无需高温处理，更多地保留了制备的功能肽和水产蛋白本身所含功能性成分的生物学活性，并且简化了活性肽的制备工序和降低了活性肽的生产成本，有着良好的应用前景。CN105624242ACN105624242A权利要求书1/1页1.一种利用水产蛋白高温发酵制备活性肽的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：（1）将斜面保藏的能产耐高温蛋白酶的地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）HL-3接入到灭菌后冷却的LB液体培养基中，于55℃、150r/min培养12h，制备成地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）HL-3种子液备用；（2）将新鲜的水产蛋白绞碎后备用；（3）将步骤（2）制得的绞碎的水产蛋白放入到发酵罐中，并向发酵罐中加入水和营养物，混匀后得到发酵培养基；（4）往步骤（3）获得的发酵培养上接入步骤（1）所制备的地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）HL-3种子液；（5）液态发酵过程的控制：发酵温度为55℃～60℃，无菌空气通入量为0.5vvm～2.5vvm，发酵罐的转速为150rpm～350rpm，发酵时间为42h～48h；（6）成品处理：将步骤（5）得到的发酵液进行过滤去除沉淀而得到上清液；上清液通过截留分子量为5000道尔顿的超滤膜的超滤去除大分子蛋白质而得到透过液；透过液然后通过截留分子量为200道尔顿的纳滤膜的纳滤去除氨基酸而得到浓缩液；浓缩液经过冷冻干燥而制备得到活性肽成品。2.根据权利要求1所述的一种利用水产蛋白高温发酵制备活性肽的方法，其特征在于：所述步骤（1）中所用的能产耐高温蛋白酶的地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）HL-3在广东省微生物菌种保藏中心的保藏编号为GDMCCNo：60003。3.根据权利要求1所述的一种利用水产蛋白高温发酵制备活性肽的方法，其特征在于：所述步骤（2）中的水产蛋白为罗非鱼下脚料、南极磷虾、虾头、扇贝裙边、鳕鱼下脚料、鱿鱼下脚料、青鳞鱼下脚料、青鱼下脚料、鲢鱼下脚料、草鱼下脚料和鲣鱼下脚料中的一种。4.根据权利要求1所述的一种利用水产蛋白高温发酵制备活性肽的方法，其特征在于：所述步骤（3）中水产蛋白的加入量以添加的水产蛋白的质量占发酵培养基总质量百分比计，为10%～30%。5.根据权利要求1所述的一种利用水产蛋白高温发酵制备活性肽的方法，其特征在于：所述步骤（3）中营养物为葡萄糖、食品级氯化钙、食品级氯化亚铁和食品级磷酸氢二钾组成的混合物。6.根据权利要求1所述的一种利用水产蛋白高温发酵制备活性肽的方法，其特征在于：所述步骤（3）中的营养物的加入量以添加的营养物的质量占发酵培养基总质量百分比计，分别为：葡萄糖0.01%～5%，食品级氯化钙0.01%～5%，食品级氯化亚铁0.01%～5%，食品级磷酸氢二钾0.01%～5%。7.根据权利要求1所述的一种利用水产蛋白高温发酵制备活性肽的方法，其特征在于：所述步骤（4）中地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）HL-3种子液的接种量以接入的种子液的质量占发酵培养基总质量百分比计，为1%～15%。2CN105624242A说明书1/4页一种利用水产蛋白高温发酵制备活性肽的方法技术领域[0001]本发明涉及一种利用水产蛋白高温发酵制备活性肽的方法，属于水产品加工与利用的领域。背景技术[0002]蛋白质酶解的后的产物小肽不但容易消化、吸收，而且还具有抗高血压、抗胆固醇、抗血栓形成、改善脂质代谢、增强人体体能、帮助恢复疲劳、促进钙磷和其它微量元素的吸收、促进大脑发育、提高记忆力