一种亚稳态丝素蛋白纳米颗粒、及其溶液的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105832706A(43)申请公布日2016.08.10(21)申请号201610334861.2(22)申请日2016.05.19(71)申请人苏州大学地址215123江苏省苏州市工业园区仁爱路199号(72)发明人吕强肖丽媖(74)专利代理机构北京集佳知识产权代理有限公司11227代理人常亮(51)Int.Cl.A61K9/51(2006.01)A61K47/42(2006.01)C08J3/03(2006.01)C08L89/00(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图2页(54)发明名称一种亚稳态丝素蛋白纳米颗粒、及其溶液的制备方法(57)摘要本发明公开一种亚稳态丝素蛋白纳米颗粒，及亚稳态丝素蛋白纳米颗粒溶液的制备方法，亚稳态丝素蛋白纳米颗粒的直径在100～200nm之间，且尺寸均一性较高，分散性好、不易聚集，有利于以此为药物载体构建不同功能和释放行为的载药丝素蛋白颗粒，在制备亚稳态丝素蛋白纳米颗粒溶液的过程中，通过溶剂体系、丝素蛋白纤维质量、溶解温度、溶解时间、透析过程中温度、换水时间、离心速率及离心时间的协同控制，最终形成结构均一的亚稳态丝素蛋白纳米颗粒溶液，同时，该种制备方法，工艺简单，且得到的产物无有机溶剂残留、生物相容性好。CN105832706ACN105832706A权利要求书1/1页1.一种亚稳态丝素蛋白纳米颗粒，其特征在于，所述亚稳态丝素蛋白纳米颗粒的直径在100～200nm之间，为亚稳态结构。2.一种亚稳态丝素蛋白纳米颗粒溶液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将甲酸和溴化钾混合，并搅拌混匀；S2、加入脱胶蚕丝，并挤压至全部浸润，得到混合液；S3、将所述混合液置于烘箱中，调节至第一温度下放置一段时间，得到混合溶液；S4、将所述混合溶液装进透析袋，在去离子水中透析2～4天，期间换水若干次；S5、离心，之后收集沉淀物，将所述沉淀物用超纯水重新分散，得到亚稳态丝素蛋白纳米颗粒溶液。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中甲酸的质量分数为88～98％，体积为1～2.5ml，所述溴化钾的浓度为7～8.5M，体积为40～48ml。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中脱胶蚕丝的质量为0.5～2g。5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中的第一温度为40～75℃。6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中的时间为1～8h。7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S4中去离子水的温度为0～20℃。8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S4中换水的间隔时间为1～6h。9.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S5中离心的速度为6000～10000rpm。10.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S5中离心的时间为10～40min。2CN105832706A说明书1/5页一种亚稳态丝素蛋白纳米颗粒、及其溶液的制备方法技术领域[0001]本发明涉及纳米颗粒技术领域，尤其涉及一种亚稳态丝素蛋白纳米颗粒，及亚稳态丝素蛋白纳米颗粒溶液的制备方法。背景技术[0002]丝素蛋白由于具有好的生物相容性、优良的机械性能，并可调节降解速度，因而能稳定药性、制备溶液基药物和调控药物加载，是可控药物释放的通用载体。根据不同的药物递送应用的需要，丝素蛋白可再生形成可注射的纳米颗粒、微球、水凝胶和粘合剂以及固定位置植入的薄膜和支架等各种形态。对丝素蛋白的进一步修饰被用于优化结构，组成和结晶度，使得产物能与靶向药物匹配，并且在保证药物活性的同时具有可设计的释放行为。由于丝素蛋白通过包封，吸附和封装能稳定各种不同药物，基因、生物药物、小分子药物等在丝素蛋白载体中都表现出可控释放。相当数量的研究表明，丝素蛋白基药物递送系统在临床应用方面很有发展前景。[0003]在上述不同形态丝素蛋白基载体中，丝素蛋白纳米颗粒由于能有效地加载不同的抗癌药物，并具有pH敏感性，在抗癌药物递送系统中的应用越来越引起关注。相分离、盐析、乳化、毛细管微粒印刷、有机溶剂沉淀和超临界二氧化碳等方法已经被用于形成不同尺寸的丝素蛋白纳米颗粒。载药丝素蛋白纳米颗粒突出的抗癌性能已经通过体外细胞实验得以证实，这进一步说明了其在临床应用的前景。通过表面包覆阳离子聚合物或聚乙烯交联，丝素蛋白纳米颗粒的胶体稳定性提高，促进了载药丝素蛋白纳米颗粒的体内应用。虽然，近年来几个关键的改进已经实现，但是现有的制备方法相对复杂，并且不能避免有机溶剂的使用，所以仍然需要进一步优化。[0004]近年来，弱氢键破坏能力的新溶剂体系被开发，以保留部分丝蛋白纤维的纳米结构。然而这类专利和