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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105861613A(43)申请公布日2016.08.17(21)申请号201610192346.5(22)申请日2016.03.30(71)申请人中山百灵生物技术有限公司地址528400广东省中山市火炬开发区九洲大道28号(72)发明人秦和平张和平梁待亮欧松娄良沈惠宾阮宇峰王明宗(74)专利代理机构中山市兴华粤专利代理有限公司44345代理人吴剑锋(51)Int.Cl.C12P33/06(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种熊去氧胆酸制备方法(57)摘要本发明公开了一种熊去氧胆酸制备方法,其特征在于包括以下步骤:将鹅去氧胆酸和溶剂A加入反应容器中,搅拌溶解,加入7-αHSDH和7-βHSDH以及辅酶II,控制反应温度和pH值,将鹅去氧胆酸转化为熊去氧胆酸,得转化液;将步骤A中的转化液升温,使7-αHSDH和7-βHSDH变性,采用高速离心机离心除去蛋白,溶液中加入氢氧化钠溶液,蒸馏除去溶剂A,加水溶解蒸馏残留物,加酸结晶,得到熊去氧胆酸粗品;将步骤B中的熊去氧胆酸粗品和溶剂B加入反应容器中,升温并回流1小时,降温至常温,过滤得到纯度大于99%熊去氧胆酸。本发明工艺简单,合成路线短,转化率高,后处理更容易,环境更友好的熊去氧胆酸制备方法。CN105861613ACN105861613A权利要求书1/1页1.一种熊去氧胆酸制备方法,其特征在于包括以下步骤:A、将鹅去氧胆酸和溶剂A加入反应容器中,搅拌溶解,加入7-αHSDH和7-βHSDH以及辅酶II,控制反应温度和pH值,将鹅去氧胆酸转化为熊去氧胆酸,得转化液;B、将步骤A中的转化液升温,使7-αHSDH和7-βHSDH变性,采用高速离心机离心除去蛋白,溶液中加入氢氧化钠溶液,蒸馏除去溶剂A,加水溶解蒸馏残留物,加酸结晶,得到熊去氧胆酸粗品;C、将步骤B中的熊去氧胆酸粗品和溶剂B加入反应容器中,升温并回流1小时,降温至常温,过滤得到纯度大于99%熊去氧胆酸。2.根据权利要求1所述的一种熊去氧胆酸制备方法,其特征在于步骤A中所述的溶剂A为醇类溶剂。3.根据权利要求1或2所述的一种熊去氧胆酸制备方法,其特征在于步骤A中所述溶剂A的用量为鹅去氧胆酸用量的3-10倍。4.根据权利要求1所述的一种熊去氧胆酸制备方法,其特征在于步骤A中所述7-αHSDH、7-βHSDH以及辅酶II的总用量为鹅去氧胆酸用量的0.1-0.5%。5.根据权利要求1所述的一种熊去氧胆酸制备方法,其特征在于步骤A中所述反应温度为20-30℃,pH值为6.5-7.5。6.根据权利要求1所述的一种熊去氧胆酸制备方法,其特征在于步骤A中鹅去氧胆酸转化为熊去氧胆酸的反应时间为2-5小时。7.根据权利要求1所述的一种熊去氧胆酸制备方法,其特征在于步骤B中7-αHSDH和7-βHSDH变性的温度为65-85℃。8.根据权利要求1所述的一种熊去氧胆酸制备方法,其特征在于步骤B中所述的酸为无机酸。9.根据权利要求1所述的一种熊去氧胆酸制备方法,其特征在于步骤C中所述的溶剂B为酯类或酮类溶剂。10.根据权利要求1或9所述的一种熊去氧胆酸制备方法,其特征在于步骤C中所述的溶剂B的用量为鹅去氧胆酸用量的5-10倍。2CN105861613A说明书1/4页一种熊去氧胆酸制备方法技术领域[0001]本发明涉及一种熊去氧胆酸制备方法。背景技术[0002]熊去氧胆酸化学名称为:3α,7β-二羟基-5β-胆烷酸,与鹅去氧胆酸、牛羊胆酸的分子式相同,立体结构不同,化学上把这两种化合物的结构关系成为同分异构体。熊去氧胆酸是白色结晶粉末,无臭,味苦。易溶于乙醇、氯仿、冰醋酸、稀碱液、略溶于乙醚,难溶于水和稀矿酸,熔点203℃。熊去氧胆酸UDCA是一种无毒性亲水胆酸,能竞争性地抑制毒性内源性胆酸在回肠的吸收,通过激活钙离子、蛋白激酶C组成的信号网络,并通过激活分裂活性蛋白基酶来增加胆汁淤积的作用。熊去氧胆酸还能竞争性地取代细胞磨合细胞器上的毒性胆酸分子,防止肝细胞和胆管细胞受到更多毒性胆酸的损害。在临床上,熊去氧胆酸主要用于溶解胆固醇型胆结石,原发性胆汁肝硬化PBC,慢性丙型肝炎,同时还用于酒精性肝病,非酒精性脂肪肝、良性复发性肝内胆汁淤积症、先天性内胆管囊性扩张症。[0003]目前国内外主要使用鹅去氧胆酸为原料经过氧化、还原两步化学反应制备熊去氧胆酸,反应过程中使用大量的溶剂和氧化、还原剂,且鹅去氧胆酸转化率较低,只有80%左右的鹅去氧胆酸转化为熊去氧胆酸,后处理复杂。[0004]故此,现有的熊去氧胆酸制备方法有待于进一步完善。发明内容[0005]本发明的目的是为了克服现有技术中的不足之处,提供一种工艺简单,合成路线短,转化率高,后处理更容易,环境更友