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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105911272A(43)申请公布日2016.08.31(21)申请号201610339702.1(22)申请日2016.05.20(71)申请人福建安欣睿捷生物科技有限公司地址350003福建省福州市仓山区盖山镇浦下村后门里122号080室(72)发明人王保民张威陈俊玉王冕谢紫君杨涛宁香雪郭素琴谭桂玉丹阳(74)专利代理机构福州市景弘专利代理事务所(普通合伙)35219代理人林祥翔吕元辉(51)Int.Cl.G01N33/543(2006.01)G01N33/531(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图2页(54)发明名称一种3-氨基-2-恶唑烷酮免疫检测方法(57)摘要本发明公开了一种3-氨基-2-恶唑烷酮免疫检测方法,呋喃唑酮在动物体内迅速代谢为3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ),检测呋喃唑酮的残留实际上是检测AOZ的残留。本发明的检测方法是将待检物中的3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)提取后改用3-醛基苯甲酸甲酯进行衍生化,得到3-醛基苯甲酸甲酯-3-氨基-2-恶唑烷酮(PCPME-AOZ),然后再测定该衍生物的含量。以NP-AOZ和PCPME-AOZ为标准品进行间接竞争酶联免疫吸附测定(icELISA),结果证明用本发明的检测方法能够显著提高呋喃唑酮残留即3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)免疫检测的灵敏度。CN105911272ACN105911272A权利要求书1/1页1.一种3-氨基-2-恶唑烷酮免疫检测方法,其特征在于,将待测样品中的3-氨基-2-恶唑烷酮通过肟反应衍生得到3-醛基苯甲酸甲酯-3-氨基-2-恶唑烷酮后进行酶联免疫吸附检测,以测定待测样品中的3-氨基-2-恶唑烷酮含量。2.如权利要求1所述的3-氨基-2-恶唑烷酮免疫检测方法,其特征在于,用3-醛基苯甲酸甲酯与待测样品中的3-氨基-2-恶唑烷酮发生肟反应。3.如权利要求1所述的3-氨基-2-恶唑烷酮免疫检测方法,其特征在于,所述的酶联免疫吸附检测为间接竞争酶联免疫吸附测定。4.如权利要求2所述的3-氨基-2-恶唑烷酮免疫检测方法,其特征在于:待测样品的获取方法为将待检物与甲醇-水混合溶液混合研匀,离心后的沉淀物为待测样品。5.如权利要求4所述的3-氨基-2-恶唑烷酮免疫检测方法,其特征在于,所述的待测样品肟反应的操作方法步骤包括:1)将沉淀物与盐酸溶液混合研匀;2)再与3-醛基苯甲酸甲酯混匀后旋干;3)再加入1,4-二氧六环在氮气保护条件下加热回流,减压旋转蒸发得到固体粉末;4)向步骤(3)的固体粉末中加入乙醇溶解;5)抽滤获取白色固体为含有衍生得到的3-醛基苯甲酸甲酯-3-氨基-2-恶唑烷酮的物质。6.如权利要求1至5所述的任一3-氨基-2-恶唑烷酮免疫检测方法,其特征在于,酶联免疫吸附检测中用完全抗原AOZ-3-醛基苯甲酸-BSA免疫动物体获得抗血清。7.如权利要求6所述的3-氨基-2-恶唑烷酮免疫检测方法,其特征在于,酶联免疫吸附检测为基于抗血清的3-醛基苯甲酸甲酯-3-氨基-2-恶唑烷酮间接竞争酶联免疫吸附反应。8.如权利要求7所述的3-氨基-2-恶唑烷酮免疫检测方法,其特征在于,酶联免疫吸附检测中以完全抗原AOZ-3-醛基苯甲酸-OVA作为固相抗原。9.如权利要求8所述的3-氨基-2-恶唑烷酮免疫检测方法,其特征在于,酶联免疫吸附检测中以3-醛基苯甲酸甲酯-3-氨基-2-恶唑烷酮为竞争性抑制物,以抗血清为一抗,以IgG-HRP为酶标二抗。10.如权利要求1所述的3-氨基-2-恶唑烷酮免疫检测方法的应用,其特征在于将待测样品中的3-氨基-2-恶唑烷酮通过肟反应衍生得到3-醛基苯甲酸甲酯-3-氨基-2-恶唑烷酮后进行酶联免疫吸附检测在3-氨基-2-恶唑烷酮快速检测试剂盒方面的应用。2CN105911272A说明书1/6页一种3-氨基-2-恶唑烷酮免疫检测方法技术领域[0001]本发明涉及含有呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-恶唑烷酮的检测方法及其应用。背景技术[0002]呋喃唑酮(痢特灵)是一种硝基呋喃类抗生素,为广谱抗菌药。3-氨基-2-恶唑烷酮(3-Amino-2-oxazolidinon,AOZ)是呋喃唑酮在动物体内的代谢物。呋喃唑酮可用于治疗细菌和原虫引起的痢疾、肠炎、胃溃疡等胃肠道疾患。对常见的革兰氏阴性菌和阳性菌有抑制作用。对毛滴虫、贾第鞭毛虫也有一定的活性。其作用机制为干扰细菌氧化还原酶从而阻断细菌的正常代谢。[0003]人口服呋喃唑酮吸收率低,通过血液循环主要停留在肠道内。但该药物对肝、肾刺激大、易充血及发生体内糖代谢及神经病变作用,并可在体内残留。过量使用呋喃唑酮可能会导致胃肠道反应;溶血性贫血、皮疹、药热等过敏反应;多发性神经炎;新生儿和G-6-P