一种木奶果提取物的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106422403A(43)申请公布日2017.02.22(21)申请号201610860048.9(22)申请日2016.09.27(71)申请人桂林茗兴生物科技有限公司地址541300广西壮族自治区桂林市兴安县界首镇百里工业园区(72)发明人蒋元勇文继承(74)专利代理机构桂林市持衡专利商标事务所有限公司45107代理人韦珍海(51)Int.Cl.B01D11/02(2006.01)权利要求书2页说明书5页(54)发明名称一种木奶果提取物的制备方法(57)摘要本发明公开了一种木奶果提取物的制备方法，该制备方法是以木奶果果实为原料，经过胶体磨研磨、纤维素酶和果胶酶酶解、超声提取、乙醇回流、水提以及滤膜和聚酰胺柱纯化等步骤来制得木奶果提取物。该制备方法有效地解决了现有技术中成分比较单一、木奶果中的许多有效成分未能保留如总糖，挥发油等、且提取率和效率偏低的技术问题。CN106422403ACN106422403A权利要求书1/2页1.一种木奶果提取物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1)将风干的木奶果果实洗净、消毒，粉碎成100～120目，并在60℃条件下干燥15～20min后，加入木奶果果实干燥后重量5～10倍的60～80％乙醇搅拌，搅拌5～10min后用胶体磨研磨30～40min；2)将步骤1)所得的料液保持在温度40～50℃，并调节pH为4～6，同时加入占木奶果果实干燥后重量0.2～0.4％的复合酶酶解1～2h，其中，复合酶是由3～5重量份纤维素酶和2～4重量份果胶酶混合而成；3)将步骤2)所得的酶解液于100～110℃保持6～10min灭菌后，置于超声频率40～50kHz，温度30～40℃下进行超声提取，提取10～20min，过滤，得到滤液1和滤渣1，备用；4)在步骤3)所得的滤渣1中加入滤渣1重量8～10倍的80～90％乙醇搅拌，搅拌10～15min后用胶体磨研磨40～60min，并置于超声频率40～50kHz，温度40～60℃下进行超声提取，提取15～20min，过滤，得到滤液2和滤渣2，备用；5)在步骤4)所得的滤渣2中加入滤渣2重量8～10倍的70～90％乙醇搅拌，搅拌20～25min后用胶体磨研磨40～60min，并加热到80～90℃，回流提取1～2h，过滤，得到滤液3和滤渣3，备用；6)在步骤5)所得的滤渣3中加入滤渣3重量6～8倍的水搅拌，搅拌20～25min后用胶体磨研磨40～60min，并加热到90～100℃，提取40～60min，过滤，得到滤液4，备用；7)合并滤液1、2、3、4，并将滤液置于4000～5000转/min的离心机上离心5～10min，过滤，得到木奶果提取液1，备用；8)先将占木奶果提取液10.3～0.5重量份的聚乙二醇加热50～60℃，至全部熔融，冷却到室温，然后依次加入0.2～0.4重量份的明胶、0.03～0.05重量份的壳聚糖和步骤7)所得的木奶果提取液1搅拌均匀，最后于-5～5℃冷藏1～2d，过滤除去沉淀，得到木奶果提取液2，备用；9)将步骤8)所得的木奶果提取液2依次通过孔径为0.1～1μm的微滤膜、孔径为0.01～0.2μm的超滤膜进行纯化，得到木奶果提取液3，备用；10)将步骤9)所得的木奶果提取液3通过聚酰胺柱层析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分别用20～30％乙醇水溶液、40～60％乙醇水溶液洗柱，收集40～60％乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即可得到木奶果提取物。2.根据权利要求1所述的木奶果提取物的制备方法，其特征在于：步骤2)中，将步骤1)所得的料液保持在温度45℃，并调节pH为5，同时加入占木奶果果实干燥后重量0.3％的复合酶酶解1.5h，其中，复合酶是由4重量份纤维素酶和3重量份果胶酶混合而成。3.根据权利要求1所述的木奶果提取物的制备方法，其特征在于：步骤4)中，在步骤3)所得的滤渣1中加入滤渣1重量9倍的85％乙醇搅拌，搅拌12min后用胶体磨研磨50min，并置于超声频率45kHz，温度50℃下进行超声提取，提取18min，过滤，得到滤液2和滤渣2，备用。4.根据权利要求1所述的木奶果提取物的制备方法，其特征在于：步骤8)中，先将占木奶果提取液10.4重量份的聚乙二醇加热55℃，至全部熔融，冷却到室温，然后依次加入0.3重量份的明胶、0.04重量份的壳聚糖和步骤7)所得的木奶果提取液1搅拌均匀，最后于0℃冷藏1.5d，过滤除去沉淀，得到木奶果提取液2，备用。5.根据权利要求1所述的木奶果提取物的制备方法，其特征在于：步骤10)中，将步骤9)2CN106422403A权利要求书2/2页所得的木奶果提取液3通过聚酰胺柱层析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分别用25％乙醇水溶液、50％乙