关节止痛膏的标准特征图谱的构建及其质量检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利(10)授权公告号CN106770850B(45)授权公告日2018.05.25(21)申请号201611081071.4审查员王宁(22)申请日2016.11.30(65)同一申请的已公布的文献号申请公布号CN106770850A(43)申请公布日2017.05.31(73)专利权人安徽安科余良卿药业有限公司地址246001安徽省安庆市迎宾路333号(72)发明人刘道芳刘海兵柏金金田湘玲马娜程济东(74)专利代理机构合肥诚兴知识产权代理有限公司34109代理人汤茂盛(51)Int.Cl.G01N30/34(2006.01)G01N30/02(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图8页(54)发明名称关节止痛膏的标准特征图谱的构建及其质量检测方法(57)摘要本发明首先公开了一种关节止痛膏的标准特征图谱的构建方法，其次是基于构建的标准特征图谱公开了一种关节止痛膏的质量检测方法，其步骤如下：按照标样溶液和参照物溶液的方法制备并测定得到待测关节止痛膏的色谱图和对照品二氢辣椒素的色谱图，将待测关节止痛膏的色谱图与构建的标准特征图谱比对，若待测关节止痛膏的色谱图中出现标准特征图谱中相同的16个特征峰，与参照物峰相应的峰为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，各特征峰的相对保留时间与标准特征图谱中各特征峰的相对保留时间的相对标准偏差在±5％以内，则该关节止痛膏的质量合格，反之则不合格，如此可以实现快速检测判断关节止痛膏的质量。CN106770850BCN106770850B权利要求书1/1页1.一种关节止痛膏的标准特征图谱的构建方法，其步骤如下：a)标样溶液、参照物溶液的准备：将至少16批次合格的关节止痛膏分别加热回流提取得到各标样溶液，将二氢辣椒素对照品加甲醇制成参照物溶液；b)高效液相色谱分析：精密吸取等量的各标样溶液、参照物溶液，分别注入高效液相色谱仪进行测定，即得各标样溶液和参照物溶液的色谱图，高效液相色谱分析的色谱条件为：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A，以0.03～0.3％的磷酸溶液为流动相B，流动相按体积比为20～50：80～50的A相和B相梯度洗脱，流速0.5～1.5ml/min，检测波长261±2nm，柱温30～40℃，进样液的进样量为10～20μl，按照二氢辣椒素计算，理论塔板数≥8000；c)标准特征图谱的构建：将得到的各标样溶液的色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，制定得到关节止痛膏的标准特征图谱，该标准特征图谱中有16个特征峰，按出现的时间顺序将所述的16个特征峰依次编号1～12、S、13～15，以参照物溶液的色谱峰的相对保留时间为1，计算得知1～15号特征峰的平均相对保留时间分别为0.405、0.441、0.480、0.521、0.564、0.622、0.654、0.664、0.769、0.825、0.851、0.880、1.062、1.228、1.563；所述的S号色谱峰是二氢辣椒素的特征峰，其平均相对保留时间为1；步骤b)中梯度洗脱的时间及流动相比例为：0～30min，A相20％→50％，B相80％→50％；35～50min，A相50％，B相50％；50～55min，A相50％→20％，B相50％→80％；55～60min，A相20％、B相80％。2.根据权利要求1所述的关节止痛膏的标准特征图谱的构建方法，其特征在于：步骤b)中所述的A相为色谱级甲醇。3.根据权利要求2所述的关节止痛膏的标准特征图谱的构建方法，其特征在于：步骤a)中各标样溶液的加热回流提取步骤为：分别取合格的关节止痛膏2片，除去盖衬，剪成小片，置250ml圆底烧瓶中，精密加入甲醇20ml，称定重量，加热回流15-30分钟，放冷，称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即为标样溶液。4.根据权利要求3所述的关节止痛膏的标准特征图谱的构建方法，其特征在于：步骤a)中参照物溶液的制备步骤为：取二氢辣椒素对照品，精密称定，加甲醇制成每1ml含30-50μg对照品溶液，滤过，取续滤液即为参照物溶液。5.一种如权利要求1-4中任一项所述关节止痛膏的标准特征图谱的构建方法在质量检测中的应用，其步骤如下：按照标样溶液和参照物溶液的方法制备并测定得到待测关节止痛膏的色谱图和二氢辣椒素对照品的色谱图，将待测关节止痛膏的色谱图与构建的标准特征图谱比对，若待测关节止痛膏的色谱图中出现标准特征图谱中相同的16个特征峰，与参照物峰相应的峰为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，各特征峰的相对保留时间与标准特征图谱中各特征峰的相对保留时间的相对标准偏差在±5％以内，则该关节止痛膏的质量合格，反之则不合格。2CN106770850B说明书1/8页关节止痛膏的标准特征图谱的构建