一种同时测定土壤样品中12种OPEs残留的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106908549A(43)申请公布日2017.06.30(21)申请号201710211513.0(22)申请日2017.03.31(71)申请人环境保护部南京环境科学研究所地址210042江苏省南京市玄武区蒋王庙街8号(72)发明人徐怀洲宋宁慧张圣虎韩志华吴晟旻张芹陈玫宏(74)专利代理机构贵阳派腾阳光知识产权代理事务所(普通合伙)52110代理人谷庆红(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/72(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/12(2006.01)权利要求书2页说明书11页附图1页(54)发明名称一种同时测定土壤样品中12种OPEs残留的方法(57)摘要本发明涉及土壤中有机磷酸酯的测定技术领域，具体是涉及一种同时测定土壤样品中12种OPEs残留的方法。本发明利用高效液相色谱-质谱联用技术结合液液萃取和固相萃取检测土壤中12种磷酸酯类化合物残留的方法。土壤样品经液液萃取和固相萃取，用高效液相色谱-质谱联用仪MRM监测离子模式分析，外标法定量。本发明的方法对于大部分OPEs来说，检出限低，稳定性好，检测灵敏度高，用于土壤中OPEs的快速筛查，基本能够满足土壤中12种OPEs残留的检测要求。CN106908549ACN106908549A权利要求书1/2页1.一种同时测定土壤样品中12种OPEs残留的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：配制混合标准溶液：a.配制单标准储备液：准确称取12种OPEs各0.01g，用甲醇溶解定容于10mL容量瓶中，配成质量浓度为1000mg/L的标准储备液；分别取100μL标准储备液于10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配制质量浓度为10mg/L的标准储备液，储存于4℃冰箱中；b.配制混合标准储备液：准确吸取200μL各单标准储备液于10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配制质量浓度为200μg/L的混合标准储备液，于4℃下保存；c.用甲醇作为溶剂，将上述混合标准储备液按比例稀释后配成质量浓度分别为0.2、1、2、5、10、20、50、100μg/L的混合标准溶液，于4℃下保存；S2：绘制标准曲线：用甲醇配制质量浓度分别为0.2,1,2,5,10,20,50和100μg/L的12种OPEs混合标准溶液，以峰面积(y)对目标物的质量浓度(x)绘制标准曲线；S3：样品采集：在采样点采集土壤样品，去除杂物，置于不锈钢盒中，冷冻干燥，研磨过60目筛，-20℃保存待测；S4：样品前处理：将上述土壤样品经冷冻干燥研磨过60目筛后，分别称取5g土壤样品于100mL离心管中，加入30mL有机溶剂作为萃取剂，超声萃取30min后，以8000r/min离心5min，将上清液置于鸡心瓶，重复上述步骤1次，合并上清液，旋转蒸发至10mL以下，用超纯水稀释到100mL，经0.45μm玻璃纤维滤膜过滤，以4mL/min的流速通过OasisHLB小柱。上样前，依次用5mL乙酸乙酯、5mL甲醇、5mL超纯水活化小柱。上样后，用5mL去离子水淋洗，弃去淋洗液，负压抽干10min，再用5mL乙酸乙酯洗脱2次，且保持洗脱流速为1mL/min。收集的洗脱液经旋转蒸发至干，用甲醇定容至1mL，待HPLC-MS/MS分析；S5：高效液相色谱质谱联用仪MRM监测离子模式分析：a.高效液相色谱条件：色谱柱：AgilentZORBAXEclipsePlusC18(150mm×2.1mm,3.5um)；流动相：0.2％(V/V)甲酸(A)和甲醇(B)；流速为0.3mL/min；柱温：30℃；进样体积：5uL；梯度洗脱程序：0～8min时，流动相为甲酸30％、甲醇70％；8～8.1min时，流动相为甲酸5％、甲醇95％；8.1～16min时，流动相为甲酸5％、甲醇95％；16～20min时，流动相为甲酸30％、甲醇70％；b.质谱条件：选择电喷雾离子(ESI)源正离子模式扫描，采用半自动进样方式，以5μL/min的流速将500μg/L的标准储备液分别注入离子源；监测模式为多反应离子监测(MRM)；选取对应的母离子峰，对其子离子进行二级质谱分析，得到碎片离子信息；S6：外标法定量：通过高效液相色谱质谱联用仪MRM监测离子模式分析后，根据绘制的色谱图计算出样品溶液的峰面积，并通过步骤S2所述的标准曲线计算出样品溶液中的12种OPEs的浓度，以信噪比S/N＝3计算仪器方法检出限(LOD)，S/N＝10作为仪器方法定量限(LOQ)。2.根据权利要求1所述的一种同时测定土壤中12种OPEs残留的分析方法，其特征在于，所述12种OPEs包括磷酸三甲酯(Trimethylphosphate,TMP)、磷酸三乙酯(Trie