牡蛎中生物活性成分集成提取方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107319400A(43)申请公布日2017.11.07(21)申请号201710450723.5(22)申请日2017.06.15(71)申请人大连豪翔生物酶工程有限公司地址116200辽宁省大连市普兰店区皮口街道平岛社区(72)发明人黄磊宋志凤(74)专利代理机构北京科家知识产权代理事务所(普通合伙)11427代理人陈娟(51)Int.Cl.A23L17/20(2016.01)A23L17/40(2016.01)A23L17/50(2016.01)A23L33/00(2016.01)权利要求书1页说明书3页附图1页(54)发明名称牡蛎中生物活性成分集成提取方法(57)摘要本发明公开了牡蛎中生物活性成分集成提取方法，它属于生物科技领域。提取方法为：将牡蛎取肉绞碎、匀浆，加纯化水和复合蛋白酶，灭酶得酶解液，酶解液过陶瓷膜得澄清液体，澄清液体过截有机膜，用纯化水多次稀释截留液再过有机膜，合并透过液，合并截留液备用，将合并的透过液入反应釜内，加β-环糊精1-5%，搅拌包埋得到包埋液；包埋液脱腥、脱色，得澄清精制液，浓缩后得浓缩液，浓缩液经喷雾干燥或冷冻干燥得牡蛎低聚肽粉；截留液中加入乙醇，下层沉淀；沉淀经乙醇、无水乙醇脱水后，真空干燥得牡蛎多糖。一次投料得到牡蛎中主要活性成分牡蛎低聚肽和牡蛎多糖，使牡蛎资源得到充分利用；产品经包埋和吸附多重处理，没有腥味苦味，口感好。CN107319400ACN107319400A权利要求书1/1页1.牡蛎中生物活性成分集成提取方法，其特征在于：具体的提取方法为：步骤一、将牡蛎取肉，洗净泥沙、绞碎、匀浆，按1:1-1:5加纯化水搅拌均匀；将料液加热至40-60℃；调料液pH2.0-6.0；加复合蛋白酶，加量为1.0-5.0%（蛋白质总量），搅拌酶解3.5-6.5h；调整酶解液pH5.0-7.0；将料液升温至70-90℃，10-30min灭酶；料液经管式离心机去除油脂和固体微粒，得酶解液；步骤二、酶解液过陶瓷膜得澄清液体，澄清液体过截留分子量2000Da-4000Da的有机膜，透过液为牡蛎蛋白低聚肽，截留液为牡蛎多糖溶液，用适量纯化水多次稀释截留液再过有机膜，至透过液固含量＜0.1%，合并透过液，合并截留液备用，将合并的透过液入反应釜内，加热至40-70℃，加β-环糊精1-5%，搅拌包埋10-30min得到包埋液；步骤三、将步骤二得到的包埋液通过颗粒活性炭柱进一步脱腥、脱色，其中所述的过柱液通过陶瓷膜脱碳粒，得澄清精制液，澄清精制液经浓缩后得浓缩液，固含量25-55%；步骤四、将步骤三制备的浓缩液经喷雾干燥或冷冻干燥得牡蛎低聚肽粉；将步骤二中合并备用的截留液中加入适量95%乙醇，使牡蛎多糖沉淀下来；经静置过夜后，倾去上层乙醇清液，收集下层沉淀；沉淀经95%乙醇、无水乙醇脱水后，真空干燥得牡蛎多糖。2CN107319400A说明书1/3页牡蛎中生物活性成分集成提取方法[0001]技术领域：本发明涉及牡蛎中生物活性成分集成提取方法，属于生物科技领域。[0002]背景技术：牡蛎（ConchaOstreae），又称生蚝、海蛎子等，属于牡蛎科（Ostreidae真牡蛎）或燕蛤科（Aviculidae珍珠牡蛎）双壳类软体动物，分布于温带和热带各大洋沿岸水域，我国沿海地区均有生长，目前已发现牡蛎有100多种，我国沿海所产牡蛎约20多种，作为主要的养殖种类有近江牡蛎、褶皱牡蛎、长牡蛎、大连湾牡蛎和密鳞牡蛎等（高蒙蒙等，2014；叶盛权等，2009）。[0003]《本草纲目》记载，牡蛎肉多食之，能细活皮肤，补肾壮阳，并能治虚损，解丹毒。中医认为牡蛎肉具有很好的滋阴和补血功效，适用于虚劳、虚损和阴虚、血亏和气血不足的病患。[0004]牡蛎肉质乳白、细嫩、营养丰富，富含蛋白质、多糖、维生素和微量元素等，是人体生长和代谢活动所必需的，被认为是人类最接近理想的食品，在古代就已被认为“海族中之最贵者”。（叶盛权等，2009）现代科学研究发现，每100g牡蛎肉含能量57千卡、蛋白质10.脂肪1.5g、钾375mg、钠270mg、钙35mg、镁10mg、铁5.5mg、铜11.5mg、磷100mg，以及维生素A、B1、B2和其他微生物，其含碘量比牛奶和蛋白高出200倍，其锌含量为其他食物之冠，还有较多的牛磺酸。牡蛎干品含蛋白质50%左右，含多糖20%以上，最高可达40%。（叶盛权等，2009；高蒙蒙等，2014）叶盛权等（2009）研究牡蛎蛋白质和水分含量分别为9.46%和81.42%,酶解后蛋白质和水分含量分别为7.36%和83.18%，酶解液浓缩后，蛋白质含量高达52.55%，活性炭脱腥效果最优，用量为0.5%，在pH7.0,30℃条件下吸附0.5h