卵黄抗体干燥粉制备的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107383189A(43)申请公布日2017.11.24(21)申请号201710683072.4(22)申请日2017.08.11(71)申请人山东阿斯可来生物技术有限公司地址251400山东省济南市济阳县济北开发区安康街6-2号（银河路东侧）(72)发明人徐卫杰李喜才王锐王斌冯海波(74)专利代理机构北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙)11548代理人李静(51)Int.Cl.C07K16/02(2006.01)C07K1/36(2006.01)C07K1/34(2006.01)C07K1/30(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称卵黄抗体干燥粉制备的方法(57)摘要本发明公开了卵黄抗体干燥粉制备的方法，其包括以下步骤：（1）饲养免疫鸡苗；（2）鸡蛋的消毒冷藏；（3）收集蛋黄；（4）稀释蛋黄液；（5）过滤；（6）沉淀脂类物质；（7）喷雾干燥。本发明采用喷雾干燥法提取的卵黄抗体提取率高，依次通过稀释、过滤、沉淀脂类的步骤，制备的卵黄抗体的纯度高，提取效率好，本发明制备的卵黄抗体在预防和治疗畜禽疾病方面具有特异性强、作用迅速、无残留等优点，尤其是在治疗与预防禽流感、安卡拉病具有极佳疗效，本发明的方法可以得到了广泛应用。本发明的方法来源广泛、成本低、无过敏反应且有营养作用，高免卵黄抗体粉,易于保存、运输和应用，可以用于制成各种畜禽疾病，尤其是禽病毒性疾病的治疗药物。CN107383189ACN107383189A权利要求书1/1页1.卵黄抗体干燥粉制备的方法，其特征在于，其包括以下步骤：（1）饲养免疫鸡苗：选取一定数量的健康的25周龄的鸡苗，隔离饲养，并在各只鸡苗的鸡翅下肌肉注射禽流感、安卡拉病灭活疫苗进行首免，于1周、2周之后分别进行相同剂量的强化免疫，首免后检测鸡苗的血清中抗体水平达8log2以上时收集鸡蛋；（2）鸡蛋的消毒冷藏：将收集的鸡蛋进行清洗干净，然后利用消毒液进行消毒，之后再清洗喷淋干净，晾干，置于4℃下冷藏；（3）收集蛋黄：将步骤（2）冷藏后的鸡蛋打蛋，并在4℃且无菌的条件下将蛋清与蛋黄分离，取蛋黄，将蛋黄利用搅拌机搅拌均匀；（4）稀释蛋黄液：边搅拌边缓慢加入2-3倍蛋黄体积的去离子蒸馏水，完全加完去离子蒸馏水后继续搅拌20min，之后置于4℃的冷藏室内静置3-5h；（5）过滤：将所述步骤（4）得到的蛋黄稀释液利用过滤膜进行过滤，取过滤液；（6）沉淀脂类物质：向过滤液中加人2倍体积的生理盐水震荡混匀,加入浓度为30g/L的邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素，搅拌均匀，在15℃下作用24h，利用离心机离心，离心转速为5000r/min，离心时间为20min，之后静置沉淀，取上清液；（7）喷雾干燥：用喷雾干燥机喷雾干燥成粉，其中，喷雾干燥机采用155℃进气,78℃出气，制成干燥粉，获得成品，置于4℃下冷藏。2.根据权利要求1所述的卵黄抗体干燥粉制备的方法，其特征在于：所述的步骤（5）之后，还设置有杀菌步骤，杀菌的条件是将过滤液加热至65-68℃，并保持此温度35min，之后在10秒内将其急速冷却到4-5℃。3.根据权利要求1所述的卵黄抗体干燥粉制备的方法，其特征在于：所述的步骤（7）中还包括对干燥粉进行筛粉的步骤，筛粉所用的筛子的筛孔直径大小为40-60微米。4.根据权利要求1所述的卵黄抗体干燥粉制备的方法，其特征在于：所述的步骤（3）中，在将蛋黄利用搅拌机搅拌均匀时，搅拌机的搅拌速率为150-200r/min，搅拌时间为15-20min。5.根据权利要求1所述的卵黄抗体干燥粉制备的方法，其特征在于：在所述的步骤（5）中，滤膜的滤孔大小为10-20微米。6.根据权利要求1所述的卵黄抗体干燥粉制备的方法，其特征在于：在所述的步骤（6）中，加入的邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素的体积为0.3倍过滤液的体积。2CN107383189A说明书1/4页卵黄抗体干燥粉制备的方法技术领域[0001]本发明涉及卵黄抗体制备技术领域，具体涉及一种卵黄抗体干燥粉制备的方法。背景技术[0002]禽流感、安卡拉病发病率和死亡率都很高，不仅给养殖业带来很大的危害，而且危及人类的健康。禽流感有多种血清型，容易产生耐药性，给疾病的治疗带来了难度。尤其在现代规模化、集约化养殖小区更容易引发此病，还常和新城疫、法氏囊等混合感染，引起大批量死亡，给养殖生产带来巨大的经济损失。禽流感目前国内主要采用灭活疫苗，但其使用效果存在差异，且抗体保护时间短，需多次免疫才能获得较强的免疫力。而安卡拉病毒传染迅速，致病性高，目前还无有显著免疫保护力的疫苗可用。[0003]卵黄抗体在预防和治疗畜禽疾病方面具有特异性强、作用迅速、无残留等优点，得到了广泛应用。而且，从免疫预防和治疗角度